[发明专利]血栓心脉宁胶囊的检测方法

权利要求书

1.一种血栓心脉宁胶囊的检测方法，其特征在于：包括如下鉴别方法和含量测定方法：

（一）鉴别方法

（1）取本胶囊20粒的内容物，研细，加乙醚40ml冷浸1小时，滤过，滤液挥干，残渣加无水乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另分别取丹参对照药材1g、川芎对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取丹参酮ⅡA对照品、冰片对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述五种溶液各1μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚60～90℃-乙酸乙酯11：2为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与丹参对照药材、丹参酮ⅡA对照品色谱相应的位置上，日光下显相同颜色的斑点；置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与川芎对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；再喷以5％磷钼酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与冰片对照品色谱相应的位置上显相同颜色的斑点；

（2）人工麝香的气相色谱鉴别：取本胶囊20粒的内容物，研细，加乙醚40ml冷浸1小时，滤过，滤液挥干，残渣加无水乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；取麝香酮对照品适量，加无水乙醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照品溶液；照气相色谱法试验，DB-FFAP毛细管柱：柱长为30m，内径为0.32mm，膜厚度为0.5μm，柱温为程序升温：起始温度为200℃，保持10分钟，以每分钟20℃的速率升温至250℃，保持10分钟；分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各1μl，注入气相色谱仪，测定；记录供试品色谱中与对照品色谱峰保留时间相同的色谱峰；

（3）取本胶囊6粒的内容物，研细，加甲醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml溶解，用乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取人工牛黄对照药材0.5g，加甲醇5ml，冷浸过夜，滤过，滤液作为对照药材溶液；再取胆酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-醋酸-甲醇 20：25：2：3的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%磷钼酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；

（二）含量测定方法：

（1）川芎含量测定

色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-1%醋酸溶液25：75为流动相；检测波长为321nm，理论板数按阿魏酸峰计算应不低于4000；

    对照品溶液的制备：取阿魏酸对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加70%甲醇制成每1ml含20μg的溶液，即得；

供试品溶液的制备：取本胶囊20粒的内容物，精密称定，研细，取0.3g~0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇20ml，称定重量，超声处理30分钟，功率250W，频率50kHz，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法： 分别精密吸取对照品溶液5μl和供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

（2）人参茎叶总皂苷含量测定

色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水20：80为流动相；检测波长为203nm，理论板数按人参皂苷Re峰计算应不低于6000；

对照品溶液的制备：取人参皂苷Rg1对照品和人参皂苷Re对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml各含人参皂苷Rg1 0.15mg、人参皂苷Re 0.50mg的混合溶液，即得；

供试品溶液的制备：取本胶囊20粒的内容物，精密称定，研细，取0.4~0.6g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加三氯甲烷50ml，超声提取30分钟，滤过，弃去滤液；药渣连同滤纸挥干溶剂，精密加入甲醇50ml，称定重量，回流提取1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液25ml，蒸干，残渣加水饱和正丁醇溶液20ml溶解，用50ml氨试液洗涤一次，弃去氨试液层，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度使溶解，摇匀，滤过，即得。