[发明专利]使用连续传代的细胞系制备新城疫病毒与疫苗的方法及其制品

权利要求书

1.一种用细胞系生产新城疫病毒的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)细胞的培养：将细胞系经消化传代，以细胞培养液进行培养，形成生长良好的细胞单层；

2)病毒接种与吸附：将新城疫病毒接种于上述生长良好的细胞单层，进行病毒吸附；

3)细胞的孵育：换用细胞维持液培养后，加入300mmol/L的D-氨基葡萄糖孵育；

4)病毒的繁殖：将上述孵育剂洗去，重新加入细胞维持液培养细胞系以繁殖新城疫病毒；

5)病毒的收获：收获含有新城疫病毒的培养液。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中接种用的新城疫病毒是使用细胞系生产的新城疫病毒。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的新城疫病毒是新城疫病毒Lasota株。

4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，所述的细胞系为：MDBK细胞系、VeroE6细胞系、BHK-21细胞系、PK-15细胞系、IBRS-2细胞系的任意一种或几种。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的细胞系为：BHK-21细胞系。

6.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，所述的孵育剂为D-氨基葡萄糖、干扰素或脂多糖。

7.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，所述的细胞孵育时间为20-40min。

8.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，所述的细胞生长液的血清含量为1％-7％v/v。

9.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，所述的细胞维持液为无血清的细胞培养液。

10.一种根据权利要求1-8任意一项所述的方法制备的新城疫病毒，其特征在于，使用细胞系生产新城疫病毒。

11.一种用细胞系生产新城疫疫苗的方法，其特征在于，使用权利要求10所述的新城疫病毒，加入灭活剂，灭活后加入兽药学上可接受的疫苗佐剂制备为新城疫疫苗。

12.一种根据权利要求11所述的方法制备的新城疫疫苗，其特征在于，使用细胞系生产新城疫疫苗。