[发明专利]一种测定毛喉鞘蕊花中半日花烷型二萜的方法

权利要求书

1.一种测定毛喉鞘蕊花中半日花烷型二萜的方法，其特征在于，采用基质固相分散-液相色谱法测定毛喉鞘蕊花中的二萜，其包括步骤：

(1)药材药品的前处理

毛喉鞘蕊花药材粉末与倍量的固体载体置于研钵中研磨3～5min，将混合样品装入固相萃取小柱，以0～10％甲醇作为淋洗剂通过小柱，抽干，加入少量洗脱剂浸润，超声后或直接以洗脱剂通过小柱，收集洗脱液，蒸干，残渣用甲醇或含水甲醇复溶解，制得供试品溶液；

(2)采用液相色谱法测定制得的供试品溶液中的半日花烷型二萜，

采用高效液相色谱法HPLC测定，所述色谱分析的固定相为十八烷基键合硅胶，流动相为乙腈-水或甲醇-水；与液相联用的检测器选自紫外、二极管阵列检测器、蒸发光散射检测器或质谱检测器。

2.按权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的毛喉鞘蕊花药材粉末与固体载体的质量比为0.1～1∶3～5。

3.按权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的固体载体为烷基键合硅胶。

4.按权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的固体载体为C₁₈键合硅胶。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的淋洗剂为0～10％甲醇。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的洗脱剂选自甲醇、甲醇-乙酸乙酯或甲醇-二氯甲烷。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中，色谱条件：色谱柱为Kromasil C₁₈柱250mm×4.6mm，5μm，Phenomenex，保护柱为C₁₈ 4.0mm×3.0mm，5μm，Phenomenex；流动相采用水(A)-乙腈(B)梯度洗脱，梯度程序为：0～8min，维持在A-48％与B-52％，8～18min，线性升高B的比例，至13min为A-34％与B-66％，维持至18min；柱温30～40℃；流速1.0mL/min；进样体积5μL；检测时间18min；质谱条件：大气压化学电离，负离子模式，离子源温度为400℃，N₂气流速为10mL/min，离子喷雾电压为-4500V，入口电压(EP)为-10V，碰撞室出口电压(CXP)为-15V。

8.按权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的半日花烷型二萜包括异佛司可林、佛司可林、佛司可林G、佛司可林J和佛司可林A。