[发明专利]一种用于生产谷胱甘肽的毕赤酵母工程菌无效
| 申请号： | 201110369992.1 | 申请日： | 2011-11-18 |
| 公开（公告）号： | CN103122322A | 公开（公告）日： | 2013-05-29 |
| 发明（设计）人： | 朱泰承;葛少林;李寅 | 申请（专利权）人： | 中国科学院微生物研究所 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12N15/81;C12P21/02;C12R1/84 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅 |
| 地址： | 100101*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 生产 谷胱甘肽 酵母 工程 | ||
1.一种构建重组菌的方法，包括如下步骤：将双功能谷胱甘肽合成酶的编码基因导入出发菌，得到重组菌；
所述双功能谷胱甘肽合成酶的氨基酸序列为序列表中的序列2。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：
所述双功能谷胱甘肽合成酶编码基因的核苷酸序列为序列表中的序列1。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：
所述双功能谷胱甘肽合成酶的编码基因通过重组载体导入出发菌。
4.根据权利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于：
所述重组载体为将双功能谷胱甘肽合成酶的编码基因插入pGAPZαH中，得到表达双功能谷胱甘肽合成酶的重组载体；
所述pGAPZαH为将his4的编码基因插入pGAPZαA的多克隆位点间得到的载体；
所述his4的编码基因的核苷酸序列为序列表中的序列3。。
5.根据权利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于：
所述出发菌为毕赤酵母菌(Pichia pastoris)；
所述毕赤酵母菌(Pichia pastoris)具体为GSl15。
6.由权利要求1-5中任一所述的方法制备的重组菌。
7.一种重组载体，为将双功能谷胱甘肽合成酶的编码基因插入pGAPZαH中，得到表达双功能谷胱甘肽合成酶的重组载体；
所述双功能谷胱甘肽合成酶的氨基酸序列为序列表中的序列2；
所述pGAPZαH为将his4的编码基因插入pGAPZαA的多克隆位点得到的载体；
所述his4的编码基因的核苷酸序列为序列表中的序列3。
8.根据权利要求7所述的重组载体，其特征在于：
所述双功能谷胱甘肽合成酶编码基因的核苷酸序列为序列表中的序列1。
9.权利要求6所述的重组菌或权利要求7或8所述的重组载体在制备谷胱甘肽中的应用。
10.一种制备谷胱甘肽的方法，包括如下步骤：发酵权利要求6所述的重组菌，收集发酵产物，即得到谷胱甘肽；
所述发酵温度具体为26℃-30℃；所述发酵时间具体为39h-42h。
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