[发明专利]一种紫胶桐酸含量的测定方法

说明书

技术领域

本发明属于检测分析技术领域，涉及一种色谱检测方法，特别涉及一种采用高效色谱检测分析方法测定紫胶桐酸含量的方法。

背景技术

紫胶树脂是食品添加剂的重要原材料，由多羟基脂肪酸和倍半萜烯酸组成的聚酯混合物，其中多羟基脂肪酸为紫胶桐酸，是一种白色晶体，是紫胶树脂结构单体中的长链脂肪酸部分，分子式为C₁₆H₃₂O₅，含有三个游离的羟基和一个游离的羧基，也称作9，10，16-三羟基棕榈酸。紫胶桐酸用途广泛，不仅可以作为大环麝香类香料化合物、营养能量剂、前列腺素、昆虫信息素、环酰脲等的前体合成原料，也可应用于防紫外线、防辐射、耐高温等航空航天材料的制备。

皂化处理是紫胶桐酸制备过程中的重要步骤，目前国内已有常温皂化法、普通加热皂化法、超声波辅助皂化法和微波皂化法，其中微波皂化法制备紫胶桐酸的方法具有操作简单，时间短，效率高，安全无污染等特点。

虽然紫胶桐酸的制备方法得到了改进，但是目前国内外尚无公认的紫胶桐酸快速、准确检测方法。对紫胶桐酸含量测定方法的研究主要有如下3种：(1)廖亚龙等用酸碱滴定法检测紫胶桐酸含量，简便快速，但酸碱滴定结果反映的是被测样品中总有机酸的含量，并不能有效甄别样品中的紫胶桐酸和其它有机酸；(2)一般含有长碳链脂肪酸结构的有机物多是通过甲酯化后用气相色谱来检测，哈成勇等采用核磁共振法测定紫胶桐酸优势构象时制备了紫胶桐酸甲酯，但制备时间长，且紫胶桐酸分子结构中由于同时含有羧基和羟基，较易发生分子间或分子内酯化，故此法用于气相色谱检测时较难实现；(3)液相色谱法可以分离紫胶桐酸，但因紫胶桐酸中没有共轭结构，在200nm～800nm并无特征吸收峰，故不能利用紫外(UV)检测器来检测。Nagappayya等报道了采用高效液相色谱(HPLC)蒸发光散射(ELSD)法检测紫胶桐酸，流动相为乙腈和水，因未明确色谱条件且无谱图佐证，难以判断其检测效果；虽然ELSD检测器灵敏度高，稳定性好，但价格比较昂贵，难以推广应用。

发明内容

本发明的目的是针对现有紫胶桐酸含量测定方法中存在的技术缺陷，提供一种能够快速，准确地测定样品中紫胶桐酸含量的方法，本发明方法测定过程中色谱图峰型完整、美观，无拖尾现象；测定结果准确、快速、选择性强而且灵敏度高。

为实现本发明的上述目的，本发明一方面提供一种测定紫胶桐酸含量的方法，包括分别制备紫胶桐酸的对照品溶液和供试品溶液，采用高效液相色谱法测定对照品溶液和供试品溶液的峰面积，按照外标法以峰面积计算供试品中紫胶桐酸的含量。

其中，所述对照品溶液的制备包括，称取紫胶桐酸标准品作为对照品，将对照品加入对照品溶剂，溶解，制成对照品溶液，其中，所述对照品溶剂为水或甲醇的水溶液；所述供试品溶液的制备包括，称取含有紫胶桐酸的样品，将样品加入样品溶剂，溶解，制成供试品溶液，其中，所述样品溶剂为水或甲醇的水溶液；所述测定包括，分别吸取对照品溶液和供试品溶液注入液相色谱仪进行液相色谱测定，采用示差折光检测器检测、记录对照品溶液和供试品溶液的峰面积。

特别是，所述对照品溶剂甲醇的水溶液中甲醇与水的体积之比为60∶40。

其中，所述甲醇的水溶液中还含有三氟乙酸。

特别是，所述甲醇的水溶液的总体积与三氟乙酸的体积之比为100∶0.1。

尤其是，所述对照品溶剂中甲醇、水、三氟乙酸的体积之比为60∶40∶0.1。

特别是，所述样品溶剂甲醇的水溶液中甲醇与水的体积之比为60∶40。

其中，所述甲醇的水溶液中还含有三氟乙酸。

特别是，所述甲醇的水溶液的总体积与三氟乙酸的体积之比为100∶0.1。

尤其是，所述样品溶剂中甲醇、水、三氟乙酸的体积之比为60∶40∶0.1。

其中，所述的高效液相色谱采用的色谱柱为氨基色谱柱(即氨基柱)或C18反相色谱柱；所述高效液相色谱的流动相为含有甲醇的水溶液。

特别是，所述氨基色谱柱选择YWG-NH₂、Ultimate XB-NH₂、Inertsil-NH₂或HypersilAPS2(NH₂)色谱柱；所述C18反相色谱柱选择Sepax GP-C18、Sepax HP-C18或ZORBAXSB-C18反相柱。

尤其是，所述C18反相色谱柱为ZORBAX SB-C18反相柱。