[发明专利]一种快速鉴别天花粉类药材的分子生物学方法无效
申请号: | 201110373203.1 | 申请日: | 2011-11-22 |
公开(公告)号: | CN103131752A | 公开(公告)日: | 2013-06-05 |
发明(设计)人: | 郝智慧;钟英杰;王艳玲 | 申请(专利权)人: | 青岛康地恩药业股份有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 266061 山东省青岛市崂*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 快速 鉴别 天花粉 药材 分子生物学 方法 | ||
1.一种鉴别天花粉及其类似品的分子鉴别新方法,是根据天花粉核糖体RNA基因中ITS序列设计3个单引物,其PCR反应体系为25μL,其中Tris-HCI(pH 9.0)10mmol·L-1,KC1 50mmol·L-1,Mg2+1.5 mmol·L-1,dNTP各 0.15 mmol·L-1,Taq 1U(promega),Primer 0.15 μmol·L-1,模板 DNA 50 ng,扩增在 ABI9700上进行,扩增程序为95℃预变性 4 min,接着进行 40个循环:95℃变性30s,50℃退火45s,72℃延伸60s,循环结束后72℃延伸5min。
2.根据权利1要求所述的一种鉴别天花粉及其类似品的分子鉴别新方法,其特征在于:扩增在ABI9700上进行,扩增程序为95℃预变性 4 min,接着进行 40个循环:95℃变性30s,50℃退火45s,72℃延伸60s,循环结束后72℃延伸5min。
3.权利1或2所述方法,其特征在于:天花粉的特征鉴别条带确定为560,960 bp条带,1930,1400,839,715 bp等条带可作为天花粉的辅助鉴别带。
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