[发明专利]一种癌靶向超抗原融合蛋白及制备方法及用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种超抗原融合蛋白及制备方法及用途，特别是涉及一种癌靶向超抗原及其突变体融合蛋白及制备方法及用途。

背景技术

超抗原融合蛋白被应用于癌症的药物研究，例如细胞因子与超抗原构建的融合蛋白(中国专利申请号200310109829.7，“一种可用以抗癌治疗的超抗原融合蛋白质及其生产方法”；中国专利申请号201010118438.1，“细胞因子-超抗原融合蛋白在制备抗实体瘤药物的应用”；中国专利申请号201010585818.6，“细胞因子-超抗原融合蛋白在制备抗癌药物的应用”；PLoSOne 6，e16642，2011)、激素与超抗原构建的融合蛋白(中国专利申请号200510078775.1“癌靶向超抗原融合蛋白质及其生产方法”)和抗体与超抗原构建的融合蛋白(Proc Natl Acad Sci USA，91，8945-8949，1994；Proc Natl Acad Sci USA，92，9791-9795，1995)，细胞因子-超抗原融合蛋白中的细胞因子和激素-超抗原融合蛋白中的激素是通过与癌细胞上大量表达的细胞因子受体和激素受体的相互作用而将融合蛋白定位到癌细胞上，而融合蛋白的另一部分即超抗原可诱导攻击癌细胞的T细胞反应的细胞毒作用。

上述超抗原是金黄色葡萄球菌肠毒素A(Staphylococcal-enterotoxin A，SEA)，它会产生全身性淋巴细胞的反应的副作用，有研究(Proc Natl Acad Sci USA，94，2489-2494，1997)对它进行了一个点突变的改造。另外，据报道SEA本身也不稳定(J Biol Chem，275，1665-1672，2000)。要提高超抗原融合蛋白的抗癌效果，可以选择除了SEA以为的新超抗原。

另外，有活性的有利用价值的物质例如化合物、核酸、多肽等都可以通过改造它们的结构而提高其活性或利用价值，以酶为例，可以通过大规模多点突变、片段置换、氨基酸去除或增加等手段来提高酶的催化活性、耐热、耐低温、耐酸、耐碱、耐有机溶剂等。所以通过对超抗原大规模的点突变改造，期待创造出生物活性更高的超抗原。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术中的不足，提供生物活性更高的一种癌靶向超抗原融合蛋白。

本发明的第二个目的是提供一种超抗原融合蛋白的制备方法。

本发明的第三个目的是提供一种超抗原融合蛋白的用途。

本发明的技术方案概述如下：

一种癌靶向超抗原融合蛋白，该融合蛋白含有：

a)促进癌细胞生长并与癌细胞过度表达受体相互作用的配体，所述配体是细胞因子、激素或非抗体非细胞因子非激素的多肽；

b)能引起抗癌免疫反应的超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素E(Staphylococcal-enterotoxin E，SEE)及其突变体，所述金黄色葡萄球菌肠毒素E用缩写SEE表示；所述金黄色葡萄球菌肠毒素E的突变体用缩写SEE-X表示，所述X＝1-3。

所述细胞因子选自缩写为TGF-α的转化生长因子-α(Transforming growth factor-α，TGF-α)、缩写为EGF的表皮生长因子(Epidermal growth factor，EGF)、缩写为VEGF的血管内皮细胞生长因子(Vascular endothelial cell growth factor，VEGF)；所述激素选自缩写为GnRH的促性腺激素释放激素(Gonadotropin-releaslng hormone，GnRH)；所述非抗体非细胞因子非激素的多肽选自缩写为GRP的促胃液素释放肽(Gastrin-releasing peptide，GRP)。

所述SEE是SEQ ID No.2所示的氨基酸序列；所述SEE-1是SEQ ID No.4所示的氨基酸序列；所述SEE-2是SEQ ID No.6所示的氨基酸序列；所述SEE-3是SEQ ID No.8所示的氨基酸序列。

所述SEE-1是SEE上的20位、21位、24位、27位、34位、39位、40位、1位、42位、44位、49位、74位、75位、78位、79位、81位、83位、84位、217位、220位、222位、223位、225位、227位上的一个或多个氨基酸被替换。