[发明专利]大流行流感病毒裂解疫苗

说明书

技术领域：

本发明属于生物医学技术领域，本发明涉及利用WHO推荐的NIBRG-14株毒株，在大流行流感全病毒疫苗的基础上，增加裂解工艺，制备成大流行流感病毒裂解疫苗，用于预防大流行流感。

背景技术：

人禽流行性感冒(Human-avian Influenza)简称人禽流感或大流行流感(Pandemic Influenza)，是指A型禽流感病毒由于种种原因突破种属屏障而感染人，引起的一种急性高度致死性禽类传染病，其感染人类的事件最先发生于中国香港。1997年5月9日，香港一名3岁男童体内分离出一株A型流感病毒，同年8月确诊为全球首例由A型禽流感病毒(H5N1)引起的人间病例。根据2005年WHO对流感大流行预警期的划分，当前全球正处在预警期的第三阶段，即以散发病例和有限的人传人疫情为特征。据世界卫生组织(WHO)报道，截止2008年4月3日，14个国家报告378例A型禽流感(H5N1)确诊病人，其中238人死亡，病死率为62.96％。

H5N1型禽流感病毒带来了全球性的威胁。H5N1亚型流感病毒具有H5亚型血凝素和Nl亚型神经氨酸酶，它能在人体内复制并引起严重的疾病。H5N1亚型病毒对现有的每一个人的免疫系统来说都是新的抗原，因此人类具有普遍的易感性，被认为是最有可能引起下一次流感大流行的病毒。

最大的担忧是，H5N1禽流感病毒继续进化成不同的抗基因突变体，感染除人之外的哺乳动物宿主，其传染范围扩大，从家禽至迁移鸟类，而通过鸟类传播，30多个国家暴发了禽流感疫情。

疫苗作为控制流感大流行的一种主要手段，受到各个国家的重视。安全有效的疫苗很可能是减小大流行疾病、维护公众健康的唯一手段。因此，发展H5N1疫苗被认为是主要的策略。

目前在研制的大流行流感疫苗包括全病毒灭活疫苗和裂解疫苗。美国巴斯德公司、法国巴斯德公司、澳大利亚CSL公司、匈牙利Onminvest公司和中国北京科兴公司等5家机构研究出产品，获得生产大流行流感疫苗的能力。

美国巴斯德公司采用美国CDC制备的重配株进行的H5N1裂解无佐剂疫苗的研究结果。他们于2005年4月至10月在451人中进行了临床试验，测试了90，45，15，7.5微克四个不同剂量的疫苗效果。结果显示，两针90微克的疫苗产生了最高的免疫反应，抗体阳性率为58％。后续试验将给部分I期的受试者加强1针，观察免疫持久性结果。

随后，法国巴斯德公司的H5N1裂解铝佐剂疫苗的临床试验结果，该试验于2005年5-7月在法国进行，疫苗株使用的是由世界卫生组织英国中心实验室NIBSC提供的NIBRG-14毒株。300名受试者分别接种30，15，7.5微克有铝或无铝佐剂裂解疫苗。其中两针30微克铝佐剂疫苗产生的抗体阳性率最高，为67％。

澳大利亚CSL公司也于2005年10月进行了H5N1裂解铝佐剂疫苗临床试验，共400名受试者参加。结果两针15微克铝佐剂疫苗的抗体阳性率为67％，并随后将继续在更大规模的人群中进行试验，也包括老年人和儿童。

在我国北京科兴与中国疾病预防控制中心共同研发的H5N1全病毒铝佐剂疫苗的临床试验于2006年6月初揭盲。疫苗在全部的受试者中表现出良好的安全性和免疫原性，仅两针10微克的全病毒疫苗就产生了78％的抗体阳性率。

巴斯德公司的大流行流感裂解疫苗在2007起为美国政府采购储备，作为高危人群使用，匈牙利已在2008年大流行流感疫苗上市；我国北京科兴在2008年奥运会生产大流行流感灭活疫苗国家政府采购储备。

大流行流感病毒裂解疫苗的优点是：①制备工艺成熟，免疫原性较高，培养的病毒含量达到滴度要求即可进行大量生产；②由于不存在活病毒颗粒，没有感染问题，安全性好；③保存方便，一般无需冻干保存；④适用人群较广，尤其适用于不能运用全病毒疫苗的人群，如12岁以下的儿童和老年人。

发明内容：

本发明的目的之一是提供一种副反应更小，免疫原性更高，接种更安全，接种人群更广泛的新疫苗。

本发明的另一目的是提供一种能高效低成本大量制备大流行流感裂解疫苗的制备方法。

本发明的大流行流感裂解疫苗包括大流行流感免疫抗原及疫苗佐剂，其中所述的大流行流感免疫抗原为WHO推荐的NIBRG-14株毒种的血凝素HA，其内毒素含量为低于70EU/ml，HA含量为40ug/ml，所述的疫苗佐剂为氢氧化铝。