[发明专利]一种拟穴青蟹ETFB基因及其克隆、检测方法和应用

权利要求书

1.一种拟穴青蟹ETFB基因，具有如SEQ ID No. 1所示的核苷酸序列。

2.一种拟穴青蟹ETFB基因，它编码的蛋白质具有如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。

3.一种拟穴青蟹ETFB基因的克隆方法，其特征在于，所述的克隆方法为利用5’-RACE和3’-RACE技术克隆拟穴青蟹电子转移黄素蛋白β亚基基因cDNA全长，包括以拟穴青蟹肝胰脏反转录产物为模板，利用3-GP1和3-GP2引物进行3’-RACE反应，扩增得到拟穴青蟹ETFB的3’端序列；以5-GP1和5-GP2引物进行5’-RACE反应，扩增得到ETFB的5’序列，其中：所述的3-GP1引物具有如SEQ ID No.3所示的核苷酸序列，3-GP2引物具有如SEQ ID No.4所示的核苷酸序列；5-GP1引物具有如SEQ ID No.5所示的核苷酸序列，5-GP2引物具有如SEQ ID No.6所示的核苷酸序列。

4.一种拟穴青蟹ETFB基因的检测方法，其特征在于，所述的检测方法至少包括使用一对半定量PCR引物，所述的一对半定量PCR引物由上游引物和下游引物组成，其中，所述的半定量PCR上游引物具有如SEQ ID NO.7所示的核苷酸序列；半定量PCR下游引物具有如SEQ ID NO.8所示的核苷酸序列。

5.如权利要求1或2所述的一种拟穴青蟹ETFB基因在拟穴青蟹线粒体电子传递链运转中的应用。