[发明专利]检测结肠腺癌相关基因启动子甲基化引物

权利要求书

1.一种检测待测DNA甲基化的引物，为如下1)或2)：

1)所示的引物由引物对A-引物对F组成；

所述引物对A由引物1和引物2组成；

所述引物对B由引物3和引物4组成；

所述引物对C由引物5和引物6组成；

所述引物对D由引物7和引物8组成；

所述引物对E由引物9和引物10组成；

所述引物对F由引物11和引物12组成；

所述引物1-引物12的核苷酸序列依次分别为序列表中的序列1-12；

2)所示的引物为所述引物对A-引物对F中的至少一种。

2.根据权利要求1所述的引物，其特征在于：

所述引物对A用于检测VIM基因的甲基化；所述引物对A具体用于检测VIM基因CpG位点的甲基化；

所述引物对B用于检测MGMT基因的甲基化；所述引物对B具体用于检测MGMT基因CpG位点的甲基化；

所述引物对C用于检测TMEFF2或HPP1基因的甲基化；所述引物对C具体用于检测TMEFF2或HPP1基因CpG位点的甲基化；

所述引物对D用于检测ESR1基因的甲基化；所述引物对D具体用于检测ESR1基因CpG位点的甲基化；

所述引物对E用于检测APC基因的甲基化；所述引物对E具体用于检测APC基因CpG位点的甲基化；

所述引物对F用于检测MLH1基因的甲基化；所述引物对F具体用于检测MLH1基因CpG位点的甲基化。

3.一种检测待测DNA的甲基化的PCR试剂，为如下1)或2)：

1)所示的PCR试剂包括PCR试剂A1-PCR试剂F1；

所述PCR试剂A1由所述引物对A、dNTPs、PCR扩增缓冲液和DNA聚合酶组成；

所述PCR试剂B1由所述引物对B、dNTPs、PCR扩增缓冲液和DNA聚合酶组成；

所述PCR试剂C1由所述引物对C、dNTPs、PCR扩增缓冲液和DNA聚合酶组成；

所述PCR试剂D1由所述引物对D、dNTPs、PCR扩增缓冲液和DNA聚合酶组成；

所述PCR试剂E1由所述引物对E、dNTPs、PCR扩增缓冲液和DNA聚合酶组成；

所述PCR试剂F1由所述引物对F、dNTPs、PCR扩增缓冲液和DNA聚合酶组成；

2)所示的PCR试剂包括PCR试剂A1-F1中的至少一种。

4.根据权利要求3所述的试剂，其特征在于：

1)所示的PCR试剂还包括PCR试剂A2-PCR试剂F2；

2)所示的PCR试剂还包括PCR试剂A2-PCR试剂F2中的至少一种；

所述PCR试剂A2-PCR试剂F2为将所述PCR试剂A1-PCR试剂F1中的dNTPs替换为dNTPs’；

所述dNTPs’由荧光素标记的dATP、荧光素标记的dGTP、dATP、dCTP和dTTP组成。

5.根据权利要求3或4所述的试剂，其特征在于：

每条所述引物在对应的所述PCR试剂中的终浓度均为400nM；

所述引物对A用于检测VIM基因的甲基化；所述引物对A具体用于检测VIM基因CpG位点的甲基化；

所述引物对B用于检测MGMT基因的甲基化；所述引物对B具体用于检测MGMT基因CpG位点的甲基化；

所述引物对C用于检测TMEFF2或HPP1基因的甲基化；所述引物对C具体用于检测TMEFF2或HPP1基因CpG位点的甲基化；

所述引物对D用于检测ESR1基因的甲基化；所述引物对D具体用于检测ESR1基因CpG位点的甲基化；

所述引物对E用于检测APC基因的甲基化；所述引物对E具体用于检测APC基因CpG位点的甲基化；

所述引物对F用于检测MLH1基因的甲基化；所述引物对F具体用于检测MLH1基因CpG位点的甲基化。

6.根据权利要求3-5中任一所述的试剂，其特征在于：

1)所示的PCR试剂由PCR试剂A1-F1和PCR试剂A2-F2组成；

2)所示的PCR试剂由PCR试剂A1-F1中的至少一种及其对应的PCR试剂A2-F2中的至少一种组成。

7.含有权利要求1或2的所述引物或含有权利要求3-6中任一所述试剂的试剂盒。