[发明专利]一种基于微流控芯片的益生菌电泳检测方法无效
申请号: | 201110384355.1 | 申请日: | 2011-11-28 |
公开(公告)号: | CN102435660A | 公开(公告)日: | 2012-05-02 |
发明(设计)人: | 成双;汪志芳;葛淑丽;王欢;王霞;张俊庆;王清江;方禹之;何品刚 | 申请(专利权)人: | 华东师范大学 |
主分类号: | G01N27/447 | 分类号: | G01N27/447;G01N21/64 |
代理公司: | 上海麦其知识产权代理事务所(普通合伙) 31257 | 代理人: | 董红曼 |
地址: | 200062 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 微流控 芯片 益生菌 电泳 检测 方法 | ||
1.一种基于微流控芯片的益生菌电泳检测方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
第一步 制备运行缓冲液
将Tris、硼酸、EDTA溶于去离子水中得到TBE储备液,加入聚环氧乙烷得到TBE-PEO储备液,经所述TBE储备液稀释并调节pH后得到运行缓冲液,于4℃温度下储存备用;
第二步 制备细菌悬浮液
将益生菌悬浮于第一步制备得到的所述运行缓冲液中,经离心去除上清液,再悬浮于所述运行缓冲液中得到细菌悬浮液;
第三步 衍生步骤
将第二步制备得到的所述细菌悬浮液与荧光染料混合,于黑暗处衍生,经离心去除上清液;
第四步 微流控芯片及其微通道的预处理
依次采用氢氧化钠溶液、去离子水、运行缓冲液对微流控芯片进行冲洗;
第五步 电泳检测步骤
采用经第四步处理的微流控芯片经过电泳进样、分离、激光诱导荧光检测,对经第三步处理的细菌悬浮液中益生菌的种类进行检测。
2.根据权利要求1所述的基于微流控芯片的益生菌电泳检测方法,其特征在于,所述第一步中的TBE储备液中,Tris浓度为4.0mmol/L, 硼酸浓度为4.0mmol/L、EDTA浓度为0.09mmol/L;所述TBE-PEO储备液中聚环氧乙烷的质量分数为0.5%。
3.根据权利要求1所述的基于微流控芯片的益生菌电泳检测方法,其特征在于,所述第一步中,调节pH为8.5。
4.根据权利要求1所述的基于微流控芯片的益生菌电泳检测方法,其特征在于,所述第三步中的荧光染料为SYTO 62。
5.根据权利要求1所述的基于微流控芯片的益生菌电泳检测方法,其特征在于,所述第四步中的氢氧化钠溶液的浓度为1mol/L。
6.根据权利要求1所述的基于微流控芯片的益生菌电泳检测方法,其特征在于,所述第五步中,电泳进样时的电压设置为第一液槽1300V,第二液槽650V,第三液槽0V,第四液槽1000V,持续15s;电泳分离时的电压设置为第一液槽1300V,第二液槽2150V,第三液槽1300V,第四液槽0V,持续200s。
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