[发明专利]一种大菱鲆耐高温个体的筛选方法

权利要求书

1.一种大菱鲆耐高温个体的筛选方法，通过在大菱鲆胚胎发育至出现心跳之后的三个发育时期：器官形成期、尾芽期、出膜前期，使用不同温度的高温海水进行不同时间长度的高温胁迫，通过死亡淘汰法选择耐高温的大菱鲆个体，而不同热激温度-热激时长的组合，可以获得不同比率的正常初孵仔鱼。

2.根据权利要求1所述的一种大菱鲆耐高温个体的筛选方法，其具体步骤为：

（1）镜检胚胎：在大菱鲆受精卵孵化设施中取样，使用显微镜/解剖镜观察发育情况，判别胚胎发育时期；

（2）确定选择压力及需要筛选的耐高温个体占全部胚胎数量的百分比，通过表1、2、3查询所适用不同的热激温度-热激时长组合；

表1、热激温度-热激时长组合处理后孵化仔鱼正常率对照表——器官形成期

表2、热激温度-热激时长组合处理后孵化仔鱼正常率对照表——尾芽期

表3、热激温度-热激时长组合处理后孵化仔鱼正常率对照表——出膜前期

（3）预热水浴锅或其它温控设备，使其加热海水，使海水温度达到设计热激温度；

（4）准备热激网具、计时器等用品；

（5）将胚胎转入热激网中，将网的大部分浸入预设温度的水体中，使需要被热激的受精卵迅速浸入预设温度的高温水体中，同时开始计时；

（6）待热激时长达到预设时长后，迅速将热激网具从高温水体中转移至正常水温中进行孵化，孵化过程中及时吸出沉卵，防止水质下降影响孵化效果；

（7）大菱鲆受精卵孵化完成后，去除沉卵、死卵、畸形仔鱼，将发育正常的仔鱼进行常规苗种人工培育，这些苗种即是耐高温能力总体较强的大菱鲆鱼。

3.根据权利要求1所述的一种大菱鲆耐高温个体的筛选方法，注意以下几点：

(1)必须选择发育至器官形成期、尾芽期和出膜前期的大菱鲆受精卵用于热激筛选，其余时期进行此筛选，成活率极低，严重影响筛选效果；

(2)热激过程全部为温度的急性转变，即受精卵从常温水中不经温度过渡转移至高温水体中热激，完成热激后也不经温度过渡直接转移至常温水体中；

(3)操作轻柔，尽量减少机械振动对受精卵的不利影响；

(4)热激温度-热激时长可以根据具体要求的高温淘汰率相应调整，在表1、2、3中区间内尝试进行调整即可。