[发明专利]一种检测动物肌肉组织中替米考星的前处理试剂盒及方法有效
申请号: | 201110384831.X | 申请日: | 2011-11-28 |
公开(公告)号: | CN102393430A | 公开(公告)日: | 2012-03-28 |
发明(设计)人: | 刘永涛;艾晓辉;邹世平;何力;杨红;喻亚丽 | 申请(专利权)人: | 中国水产科学研究院长江水产研究所 |
主分类号: | G01N30/14 | 分类号: | G01N30/14 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人: | 王敏锋 |
地址: | 430223 湖北省武*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 动物 肌肉 组织 中替米考星 处理 试剂盒 方法 | ||
1.一种动物肌肉组织中替米考星检测的前处理试剂盒,试剂盒由盒体、试剂管A、试剂袋B、试剂管C、试剂瓶D、试剂瓶E、试剂袋F组成,其特征在于:盒体内分为a、b、c、d 4个区,a和b区为试剂管A和试剂管C放置的孔区,c区放试剂袋B和试剂袋F的凹槽,d区放试剂瓶D和试剂瓶E的凹槽;
所述的试剂管A中是乙酸乙酯、丙酮、乙腈、甲醇、二氯甲烷中任一种液体试剂;
所述的试剂袋B中是氯化钠、碳酸钠、硝酸钾、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、磷酸二氢铵、硫酸钠或硫酸镁中任一种试剂;
所述的试剂管C中是乙酸乙酯、丙酮、乙腈、甲醇、二氯甲烷中任一种液体试剂;
所述的试剂瓶D 中是氯化钠、碳酸钠、硝酸钾、磷酸氢二钾、磷酸二氢钠、磷酸二氢铵、硫酸钠钾或硫酸镁中任一种试剂的溶液;
所述的试剂瓶E中是乙酸乙酯、丙酮、乙腈、甲醇、二氯甲烷中任一种液体试剂;
所述的试剂试剂袋F中是氯化钠、碳酸钠、硝酸钾、磷酸氢二钾、磷酸二氢钠、磷酸二氢铵、硫酸钠钾或硫酸镁中任一种试剂。
2.根据权利要求1所述一种动物肌肉组织中替米考星检测的前处理试剂盒,其特征在于:所述的试剂瓶D中的试剂溶液D的配制方法:取试剂D 2-20 g,溶于200 mL的蒸馏水中溶解配制成浓度为1%-10%的试剂D的溶液。
3.根据权利要求1所述一种动物肌肉组织中替米考星检测的前处理试剂盒,其特征在于:所述的试剂F的溶液的配制方法为:取试剂F 0.6-3 g,溶于500 mL的蒸馏水中,配制成浓度为10 mM-50mM的试剂F的溶液,液体试剂E和试剂F的溶液,两者的体积比E:F=1:9-1:1。
4.权利要求1所述的一种动物肌肉组织中替米考星检测前处理试剂盒的方法,其步骤是:
A、取动物肌肉组织2.0 g于50 mL塑料离心管中,加入试剂A 5-10 mL,振荡30 s;所述试剂A是乙酸乙酯、丙酮、乙腈、甲醇、二氯甲烷中任一种液体试剂;
B、再加入试剂B 2-10 g,振荡30 s,5000 r/min离心5 min,将上清液转移至鸡心瓶中,45 ℃旋转蒸发至干;所述试剂B是氯化钠、碳酸钠、硝酸钾、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、磷酸二氢铵、硫酸钠或硫酸镁中任一种试剂;
C、向鸡心瓶中加入试剂C 2-10 mL,将其转移至15 mL离心管中;所述试剂C是乙酸乙酯、丙酮、乙腈、甲醇、二氯甲烷中任一种液体试剂;
D、再向其中加入试剂D的溶液1-5 mL,振荡30 s,5000 r/min离心5 min,将上层液体取出置于15 mL离心管中,置45 ℃氮吹仪吹至干;所述试剂D的溶液是氯化钠、碳酸钠、硝酸钾、磷酸氢二钾、磷酸二氢钠、磷酸二氢铵、硫酸钠钾或硫酸镁中任一种试剂的溶液;
E、剩余物用1 mL液体试剂 E和试剂F的溶液的混合溶液溶解,再加入2 mL正己烷,漩涡振荡30 s,5000 r/min离心5 min,去除上层液正己烷层,下层液体经0.22 μm滤头过滤,UPLC(超高效液相色谱)测定;所述的试剂E 是乙酸乙酯、丙酮、乙腈、甲醇、二氯甲烷中任一种液体试剂;所述的试剂F是氯化钠、碳酸钠、硝酸钾、磷酸氢二钾、磷酸二氢钠、磷酸二氢铵、硫酸钠钾或硫酸镁中任一种试剂。
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