[发明专利]一种从蚕体中提取纯化高纯度墨蝶呤的方法有效
| 申请号： | 201110387345.3 | 申请日： | 2011-11-30 |
| 公开（公告）号： | CN102516246A | 公开（公告）日： | 2012-06-27 |
| 发明（设计）人： | 孟艳;王敬;高俊山;王文静;刘朝良 | 申请（专利权）人： | 安徽农业大学 |
| 主分类号： | C07D475/04 | 分类号： | C07D475/04 |
| 代理公司： | 安徽合肥华信知识产权代理有限公司 34112 | 代理人： | 余成俊 |
| 地址： | 230036 *** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 蚕体中 提取 纯化 纯度 蝶呤 方法 | ||
1.一种从蚕体中提取纯化高纯度墨蝶呤的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）、解剖蚕体，尽可能剔除内脏组织，保存体壁；
（2）、称取一定量的蚕体壁，用剪刀剪成碎片，按照料液比1:（18-22）加入浓度为45-55%的乙醇，用高速组织破碎机制成匀浆，在95-105℃沸水浴中加热8-12min；
（3）、将加热后的匀浆进行离心分离，转速为15000rpm，离心温度为3-5℃, 离心时间28-32min，收集上清液；
（4）、上清液通过滤纸进行过滤,在25-30℃下减压真空浓缩滤液至原体积的1/5-1/7；
（5）、浓缩液经ECTEOLA纤维素柱吸附，先用纯水洗脱柱子，待色素完全分离开间距超过5cm后用0.01M乙酸洗脱柱子，收集含墨蝶呤色素条带的洗脱液；
（6）、将洗脱液浓缩至干后溶解于适量纯水中，得到黄色溶液；
(7）、黄色溶液经Sephadex G-25-150柱纯化，用纯水洗脱，收集色素洗脱液；
（8）、重复步骤（6）；
（9）、将黄色溶液用磷酸纤维素柱进一步纯化，用纯水洗脱，收集色素洗脱液；
（10）、最后再将步骤（9）所得色素洗脱液浓缩至干，即得高纯度的墨蝶呤。
2.根据权利要求1所述的一种从蚕体中提取纯化高纯度墨蝶呤的方法，其特征在于：步骤（2）中加入乙醇时，蚕体壁碎片与乙醇的的料液比为1：20，所加的乙醇为50%的乙醇溶液。
3.根据权利要求1所述的一种从蚕体中提取纯化高纯度墨蝶呤的方法，其特征在于：步骤（3）的离心温度为4℃，步骤（4）的浓缩温度为30℃。
4.根据权利要求1所述的一种从蚕体中提取纯化高纯度墨蝶呤的方法，其特征在于：步骤（4）至步骤（10）的操作在室温下的暗室中进行。
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