[发明专利]一种羰基还原酶及其基因和在不对称还原羰基化合物中的应用

权利要求书

1.一种羰基还原酶，其特征在于：其是如下(a)或(b)的蛋白质：

(a)由序列表中SEQ ID No.2所示氨基酸序列组成的蛋白质；

(b)在(a)中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有羰基还原酶活性的由(a)衍生的蛋白质。

2.一种羰基还原酶基因，其特征在于：其是如下(1)或(2)的基因：

(1)由序列表中SEQ ID No.1所示核苷酸序列组成的基因；

(2)编码如下蛋白质(a)或(b)的基因：

(a)由序列表中SEQ ID No.2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

(b)在(a)中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有羰基还原酶活性的由(a)衍生的蛋白质。

3.一种包含如权利要求2所述的羰基还原酶基因的重组表达载体。

4.一种包含如权利要求3所述的重组表达载体的重组表达转化体。

5.一种重组羰基还原酶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：培养如权利要求4所述的重组表达转化体，获得重组表达的羰基还原酶。

6.一种如权利要求1所述的羰基还原酶作为催化剂在不对称还原前手性羰基化合物制备手性醇中的应用。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于：所述的应用按下述方法进行：在pH 5.5-7.0的磷酸盐缓冲液中，在葡萄糖脱氢酶、葡萄糖和NADP+的存在下，在如权利要求1所述的羰基还原酶作用下，将前手性羰基化合物进行不对称还原反应，制得光学活性手性醇。

8.如权利要求6所述的应用，其特征在于：所述的前手性羰基化合物为α-酮酯、β-酮酯或者芳基酮类化合物。

9.如权利要求8所述的应用，其特征在于，所述的前手性羰基化合物为如式1、2、3所示的前手性羰基化合物：

       式1                       式2                  式3

其中，R₁为烷基、苯基或带有取代基的苯基，取代基为卤素或烷基；

R₂为烷基；

R₃为烷基或卤代烷基；

R₄为卤代烷基。

10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，

R₁为-CH₃、-C₆H₅、o-Cl-C₆H₄-或-(CH₂)₂C₆H₅；

R₂为-CH₃或-CH₂CH₃；

R₃为-CH₂CH₃、-CH₂Cl、-CH₂Br或-CF₃；

R₄为-CH₂Cl、-CH₂Br或-CF₃。