[发明专利]五味子药渣中活性成分多糖的制备方法

权利要求书

1.五味子药渣中活性成分多糖的制备方法，其特征在于步骤如下：

(1)原料处理：将五味子药渣常温干燥或40～50℃烘干；

(2)多糖提取：按每公斤五味子药渣加水10～30公斤，在60～100℃的温度下浸提2～6小时；沉淀再用同样方法重复提取1～2次，合并提取液；

(3)醇沉：将提取液于50～60℃浓缩至原体积的1/6～1/5，之后冷却，加入2～3倍体积95％的乙醇，4℃醇沉过夜，离心，沉淀用无水乙醇和乙醚洗涤后干燥；

(4)冻融：将沉淀配成5％的糖液，过夜冻实，常温融化，当为冰水混合物时，离心，上清重复上述冷冻步骤2～5次；

(5)乙醇分级：在冻融后糖液内加乙醇至终浓度为30％，4℃沉淀2～3天，离心，沉淀干燥；上清加乙醇至终浓度为60％，4℃沉淀2～3天，离心，沉淀干燥；

(6)除蛋白：将沉淀配成5％的糖液，加入链蛋白酶，比例为蛋白∶蛋白酶＝200∶1，37℃酶解45～50小时脱蛋白，取出后浓缩至原体积，再用Sevag法脱蛋白3～6次后得到多糖溶液；

(7)干燥：将多糖溶液冷冻干燥过夜，得到五味子药渣多糖。

2.如权利要求1所述的五味子药渣中活性成分多糖的制备方法，其特征在于乙醇分级加入乙醇时将乙醇放入分液漏斗，盛糖液器皿放于磁力搅拌器上，使乙醇逐滴加入。

3.如权利要求1所述的五味子药渣中活性成分多糖的制备方法，其特征在于五味子药渣为护肝片生产后剩余五味子残渣。

4.如权利要求1所述的五味子药渣中活性成分多糖的制备方法，其特征在于所述的水为去离子水、蒸馏水、纯水或含矿物离子水。

5.如权利要求1所述的五味子药渣中活性成分多糖的制备方法，其特征在于步骤(3)中离心转速3000r/min，时间10min。

6.如权利要求1所述的五味子药渣中活性成分多糖的制备方法，其特征在于步骤(4)中离心转速7000r/min，温度4℃，时间10min。

7.如权利要求1-6任一所述的五味子药渣中活性成分多糖的制备方法，其特征在于：

(1)原料处理：将五味子药渣常温干燥或45℃烘干；

(2)多糖提取：按每公斤五味子药渣加水30公斤，在100℃的温度下浸提2小时；沉淀再用同样方法重复提取2次，合并提取液；

(3)醇沉：将提取液于60℃浓缩至原体积的1/6，之后冷却，加入3倍体积95％的乙醇，4℃醇沉过夜，离心，沉淀用无水乙醇和乙醚洗涤后干燥；

(4)冻融：将沉淀配成5％的糖液，过夜冻实，常温融化，当为冰水混合物时，离心，上清重复上述冷冻步骤4次；

(5)乙醇分级：在冻融后糖液内加乙醇至终浓度为30％，4℃沉淀3天，离心，沉淀干燥；上清加乙醇至终浓度为60％，4℃沉淀2～3天，离心，沉淀干燥；

(6)除蛋白：将沉淀配成5％的糖液，加入链蛋白酶，比例为蛋白∶蛋白酶＝200∶1，37℃酶解48小时脱蛋白，取出后浓缩至原体积，再用Sevag法脱蛋白5次后得到多糖溶液；

(7)干燥：将多糖溶液冷冻干燥过夜，得到五味子药渣多糖。