[发明专利]五味子药渣中活性成分多糖的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药提取方法，即五味子药渣中活性成分多糖的制备方法。

背景技术

在现有技术中，随着制药工业的进步，中草药有效成分提取工艺的发展，产生了很多中药药渣。中药渣多被作为燃料焚烧或当作垃圾废弃，这不仅是对资源的极大浪费，同时也对环境造成污染，特别是提取过程中多以乙醇作为溶剂，或者因为入药需求的原因，仅提取了中药的某一成分，剩余物中还有大量的活性成分没有被充分提取出来，残留在药渣中，其仍然具有药用和营养价值。五味子药渣就是其中的一种。五味子，俗称山花椒，为木兰科植物五味子(FructusSchisandraeChinensis)的果实。具有收敛固涩、益气生津、补肾宁心之功效。目前的研究发现北五味子多糖具有保肝、抗疲劳、免疫促进、抗氧化及抗衰老和抗肿瘤的药理作用。制药企业在提取五味子有效成分的过程中大多采用乙醇回流的方式，将五味子中的脂溶性成分提取利用，而水溶性多糖大多残留于药渣中被废弃。

发明内容

本发明的目的是提供一种以五味子药渣为原料，工艺合理，提取率高的五味子药渣中活性成分多糖的制备方法。

本发明的技术解决方案是：五味子药渣中活性成分多糖的制备方法，步骤如下：

(1)原料处理：将五味子药渣常温干燥或40～50℃烘干。

(2)多糖提取：按每公斤五味子药渣加水10～30公斤，在60～100℃的温度下浸提2～6小时；沉淀再用同样方法重复提取1～2次，合并提取液；

(3)醇沉：将提取液于60℃浓缩至原体积的1/6～1/5，之后冷却，加入3倍体积95％的乙醇，4℃醇沉过夜，离心，沉淀用无水乙醇和乙醚洗涤后干燥。

(4)冻融：将沉淀配成5％的糖液，过夜冻实，常温融化，当为冰水混合物时，离心，上清重复上述冷冻步骤2～5次；冻融可以除去多糖中的杂质。

(5)乙醇分级：在冻融后糖液内加乙醇至终浓度为30％，4℃沉淀2～3天，离心，沉淀干燥；上清加乙醇至终浓度为60％，4℃沉淀2～3天，离心，沉淀干燥；

(6)除蛋白：将沉淀配成5％的糖液，加入链蛋白酶，比例为蛋白∶蛋白酶＝200∶1，37℃酶解45～50小时脱蛋白，取出后浓缩至原体积，再用Sevag法(氯仿∶正丁醇＝4∶1)脱蛋白3～6次后得到多糖溶液；

(7)干燥：将多糖溶液冷冻干燥过夜，得到五味子药渣多糖。经红外光谱分析，其具有多糖的特征性吸收峰。

五味子药渣中活性成分多糖的制备方法，步骤如下：

(1)原料处理：将五味子药渣常温干燥或45℃烘干；

(2)多糖提取：按每公斤五味子药渣加水30公斤，在100℃的温度下浸提2小时；沉淀再用同样方法重复提取2次，合并提取液；

(3)醇沉：将提取液于60℃浓缩至原体积的1/6，之后冷却，加入3倍体积95％的乙醇，4℃醇沉过夜，离心，沉淀用无水乙醇和乙醚洗涤后干燥；

(4)冻融：将沉淀配成5％的糖液，过夜冻实，常温融化，当为冰水混合物时，离心，上清重复上述冷冻步骤4次；

(5)乙醇分级：在冻融后糖液内加乙醇至终浓度为30％，4℃沉淀3天，离心，沉淀干燥；上清加乙醇至终浓度为60％，4℃沉淀2～3天，离心，沉淀干燥；

(6)除蛋白：将沉淀配成5％的糖液，加入链蛋白酶，比例为蛋白∶蛋白酶＝200∶1，37℃酶解48小时脱蛋白，取出后浓缩至原体积，再用Sevag法脱蛋白5次后得到多糖溶液；

(7)干燥：将多糖溶液冷冻干燥过夜，得到五味子药渣多糖。

所述乙醇分级加入乙醇时将乙醇放入分液漏斗，盛糖液器皿放于磁力搅拌器上，使乙醇逐滴加入。

五味子药渣为护肝片生产后剩余五味子残渣。

所述的水为去离子水、蒸馏水、纯水或含矿物离子水。

步骤(3)中离心转速3000r/min，时间10min。

步骤(4)中离心转速7000r/min，温度4℃，时间10min。

本发明的优点是：1、工艺合理，注重合理利用原料，将制药企业的废料五味子药渣充分利用，既避免了浪费又有利于环境保护。2、本发明在提取的过程中，利用的最佳的提取工艺，大大的提高了提取率。3、本发明在乙醇分级过程中，采用边搅拌边滴加乙醇的方法，比普通的醇沉效果好，提高多糖的得率。4、本发明利用了链蛋白酶和Sevag法联合脱蛋白，脱除次数少，操作过程简化。

下面将结合实施例对本发明的实施方式作进一步详细描述。

具体实施方式

实施例1