[发明专利]一种改进的人延长因子1α启动子

权利要求书

1.一种改进的人延长因子1α启动子，为在人EF-1α启动子序列的第105与106位碱基间插入了序列为GGCCAATCT的多核苷酸片段。

2.如权利要求1所述改进的人延长因子1α启动子，其特征在于，所述的改进启动子的核苷酸序列为SEQ ID NO：1。

3.如权利要求1或2所述改进的人延长因子1α启动子用于哺乳动物来源的蛋白或多肽的细胞表达的用途。

4.如权利要求3所述的用途，其特征在于，所述的哺乳动物来源的蛋白或多肽选自促红细胞生成素、长效EPO、具有促红细胞生成素活性的改构促红细胞生成素或抗体。

5.如权利要求1或2所述改进的人延长因子1α启动子用于哺乳动物细胞表达载体的用途。

6.如权利要求5所述的用途，其特征在于，所述改进的启动子作为指导外源哺乳动物来源蛋白表达的启动子用于构建或改造哺乳动物细胞表达载体。

7.如权利要求6所述的用途，其特征在于，所述改造哺乳动物细胞表达载体，为将待改造哺乳动物细胞表达载体原有的一个或多个启动子改造为权利要求1或2所述改进的人延长因子1α启动子。

8.一种哺乳动物细胞表达载体，包括至少一个权利要求1或2所述改进的人延长因子1α启动子，由所述改进的人延长因子1α启动子来指导外源哺乳动物来源蛋白质或多肽的表达。

9.如权利要求8所述哺乳动物细胞表达载体，为将载体pEF6/V5-HisA中的人EF-1α启动子改造为权利要求1或2所述改进的人延长因子1α启动子后获得。

10.一种哺乳动物来源的蛋白质或多肽的生产方法，包括下列步骤：

1)采用权利要求8或9所述哺乳动物细胞表达载体构建所述哺乳动物来源的蛋白质或多肽的重组表达载体；

2)将步骤1获得的重组表达载体转入宿主细胞，并在合适表达所述哺乳动物来源的蛋白质或多肽的条件下培养所述宿主细胞；

3)从培养物中分离出所述哺乳动物来源的蛋白质或多肽。

11.如权利要求10所述哺乳动物来源的蛋白质或多肽的生产方法，其特征在于，所述宿主细胞为哺乳动物细胞。

12.如权利要求11所述哺乳动物来源的蛋白质或多肽的生产方法，其特征在于，所述哺乳动物细胞选自CHO细胞、vero细胞、293细胞、Hela细胞、COS细胞或BHK21细胞。

13.如权利要求10-12任一权利要求所述哺乳动物来源的蛋白质或多肽的生产方法，其特征在于，所述哺乳动物来源的蛋白质或多肽的重组表达载体为将目的基因片段插入所述哺乳动物细胞表达载体的多克隆位点，并置于所述权利要求1或2所述改进的人延长因子1α启动子的控制之下，所述目的基因片段至少包含哺乳动物来源的蛋白质或多肽的基因的完整编码区。

14.如权利要求13所述哺乳动物来源的蛋白质或多肽的生产方法，其特征在于，所述的哺乳动物来源的蛋白或多肽选自促红细胞生成素、长效EPO、具有促红细胞生成素活性的改构促红细胞生成素或抗体。