[发明专利]hSCARB2基因转殖鼠的制造及其做为肠病毒感染动物模式的应用

权利要求书

1.一种制造hSCARB2基因转殖鼠的方法，其特征在于，包含下列步骤：

a.将经由微注射入受Elongation factor-1启动子(EF-1αpromoter)驱动的人类SCARB2蛋白(hSCARB2)基因(SEQ ID NO.1)的小鼠胚胎，转殖到同品系母鼠中使其发育成鼠；

b.利用PCR分析筛检出带有hSCARB2蛋白基因型的阳性小鼠，与原生型同品系小鼠互相交配，生成F0小鼠；

c.再次以PCR分析筛选出其基因型为异核型(heterozygous)的阳性F0小鼠，并使呈阳性F0小鼠互相交配生成F1小鼠；

d.利用PCR分析筛选得其基因型为同核型(homozygous)的阳性F1小鼠，而得hSCARB2基因转殖鼠；及

e.利用RT-PCR分析确认F1基因转殖鼠在主要器官表达hSCARB2蛋白。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，该基因转殖鼠于自然界流行的肠病毒株感染后，会呈现手足口病(HFMD)的症状和神经系统的病变。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，该用于基因转殖的小鼠是C57BL/6小鼠。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，该用于基因转殖的小鼠是FVB小鼠。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，该制得的hSCARB2基因转殖鼠用做为手足口病的动物模式。

6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，该制得的hSCARB2基因转殖鼠用做为肠病毒71型的感染动物模式。

7.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，该制得的hSCARB2基因转殖鼠用做为克沙奇病毒16型(Coxsackie A16)的感染动物模式。

8.一种检测肠病毒疫苗保护效力的方法，其特征在于，利用根据权利要求1所述的方法所制得的hSCARB2基因转殖鼠为动物模式，评估候选肠病毒疫苗在疫苗接种后施予肠病毒攻毒时，对于已受免疫的hSCARB2基因转殖鼠所产生的抗病毒保护效力。

9.一种用于筛检出有效治疗肠病毒所引起的手足口病的治疗性疫苗或药物的方法，其特征在于，包含：

(1)将根据权利要求1所述的方法所制得的hSCARB2基因转殖鼠以自然界流行的肠病毒株感染，使其呈现手足口病(HFMD)的症状；

(2)将呈现病症的hSCARB2基因转殖鼠施予候选疫苗或药物；

(3)于一段治疗时间后，与未施予候选疫苗或药物的动物进行比较，以评估该候选疫苗或药物在疗肠病毒所引起的手足口病的功效。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，用于筛选出用于治疗肠病毒71型感染的药物。

11.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，用于筛选出用于治疗克沙奇病毒16型感染的药物。