[发明专利]一种具有紫罗兰香气的发酵物及其生产方法与它的用途

说明书

【技术领域】

本发明涉及微生物发酵技术。更具体地，本发明涉及一种利用解淀粉类芽孢杆菌(Paenibacillus amylolyticus)发酵生产含有7，8-二氢-β-紫罗兰醇发酵物的方法，还涉及根据所述方法制备得到的含有7，8-二氢-β-紫罗兰醇的发酵物及其作为烟用香料的用途。

【背景技术】

植物花朵、茶叶、葡萄、玫瑰及烟草物质中，普遍存在紫罗兰醇及紫罗兰酮(C13降戊二烯类)等香味衍生物。该类衍生物通常由类胡萝卜素如β-胡萝卜素、叶黄素、玉米黄素、虾青素等前体物质经过氧化裂变反应生成。在香料工业生产过程中，紫罗兰醇和紫罗兰酮是重要的人工合成香料之一，紫罗兰酮进一步还原可得到紫罗兰醇。根据紫罗兰酮双键位置的变化，主要分α和β两种异构体，两者均具有柏木香味，稀释后具有紫罗兰的香味。紫罗兰酮的香气甚为优雅、柔和，在化妆品和食品香精中应用很广。此外，β-紫罗兰酮还广泛应用于烟草、食品及饲料添加剂，是很重要的工业原料。

紫罗兰醇及紫罗兰酮被广泛应用于卷烟行业中。据报道，紫罗兰醇酯类物质在烟燃吸状态下可发生裂解反应，因此在烟气中有一种致香物质——巨豆三烯酮。巨豆三烯酮对卷烟的香气起着重要的作用，已成为评判卷烟优劣的一项重要指标。由此可见，紫罗兰醇等物质的裂解是烟草香味物质形成的重要途径，将该类香气前体物质作为料液直接加到烟草中，可显著改善烟草香气品质。

目前，紫罗兰醇及紫罗兰酮制备方法主要是工业合成法，该方法工业合成收率仅为25％，且合成原料价格昂贵不易采购。此外，植物提取法设备成本高昂，提取率极低，考虑到紫罗兰醇的工业生成条件、生产成本、原料采购价格等因素，本申请人首次尝试采用微生物发酵法制备一种具有紫罗兰香气的物质，为香精行业提供一种新型烟用香料。

【发明内容】

[发明要解决的问题]

本发明的目的是提供一种具有紫罗兰香气的发酵物的制备方法。

本发明的另一个目的是提供采用所述生产方法得到的具有紫罗兰香气的发酵物。

本发明的另一个目的是提供所述具有紫罗兰香气的发酵物作为烟用香料的用途

[技术方案]

本发明涉及一种具有紫罗兰香气的发酵物的生产方法。

所述生产方法包括以下步骤：

A、种子培养

使用酵母浸膏、NaCl、葡萄糖、蛋白胨、微量元素液与去离子水制备含有酵母浸膏4-6g/L、NaCl 25-32g/L、葡萄糖0.1-0.4g/L、蛋白胨8-15g/L、微量元素液1.0mL/L的种子培养基；所述的微量元素液是含有H₃BO₃ 3.0g/L、MgSO₄ 1.8g/L、FeSO₄ 1.36g/L、C₄H₄KNaO₆·4H₂O 1.77g/L、CuCl₂·2H₂O0.03g/L、ZnCl₂ 0.02g/L、CoCl₂·6H₂O 0.04g/L的水溶液；

把所述种子培养基加到培养瓶中，用无机碱将该种子培养基的pH值调节至弱碱性，然后灭菌，再接入以所述种子培养基体积计0.1-5％解淀粉类芽孢杆菌(Paenibacillus amylolyticus)BM-B-340，然后在室温下培养80-120小时，得到种子液；

B、摇瓶发酵

使用酵母浸膏、NaCl、蛋白胨、叶黄素、上述微量元素液与去离子水制备含有酵母浸膏5.0-5.5g/L、NaCl 25-32g/L、蛋白胨8.5-12.0g/L、叶黄素180-200mg/L、微量元素液1.0mL/L的摇瓶发酵培养基；

把所述摇瓶发酵培养基加到培养瓶中，用无机碱将该摇瓶发酵培养基的pH值调节至弱碱性，然后灭菌，再在室温下接入在步骤A得到的种子培养基，接种量是以所述摇瓶发酵培养基体积计5-10％，在50-80rpm摇床中在温度28-34℃下培养80-120h，得到发酵液；

C、分离

将步骤B得到的发酵液进行离心分离，往其上清液中加入以所述上清液体积计1∶1有机溶剂，在室温下进行振荡萃取，分离得到的有机相进行挥干，得到具有紫罗兰香气的发酵物。

根据本发明的一种优选实施方式，所述的无机碱是NaOH、KOH或Ca(OH)₂。