[发明专利]一种食用菌菌种潜伏污染细菌的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及食用菌栽培技术领域，尤其涉及食用菌菌种细菌潜伏污染的检测防控方法。

背景技术

食用菌菌种是食用菌生产之源头，食用菌菌种的纯度直接影响食用菌的生长和产量。食用菌菌种的主要生产工艺为：培养料配制、装瓶或袋、灭菌、接种、培养、保存；在食用菌菌种的生产过程中，由于灭菌不彻底，或接种、培养和保存等环节的不慎，往往会携带、污染其它真菌、细菌等微生物杂菌。其中，当真菌携带量大、污染严重时会直接表现出肉眼可见的菌斑、产生不同颜色的真菌孢子，从而在检查挑选食用菌菌种时会被容易检出并剔除；但当细菌携带量少、污染轻时，细菌会被食用菌菌丝的生长优势所抑制或隐盖，具有繁殖能力的细菌呈潜伏状态存在于食用菌菌种中，但当接种到生产下一级食用菌菌种或接种生产用于栽培出菇的菌瓶(包)时，潜伏在食用菌菌种中的细菌会大量繁殖，一方面与食用菌争夺营养和生长空间，另一方面产生有害代谢产物影响食用菌菌丝生长，进而影响子实体生长发育，导致产量与质量的“双降”而造成严重的经济损失，这对当前我国食用菌工厂化生产发展中的影响尤为显著。因此，研发一种食用菌菌种是否已被潜伏细菌污染的检测防控方法，以防止已被细菌潜伏污染的食用菌菌种用于扩繁下一级食用菌菌种或用于生产栽培出菇的菌瓶(包)，避免导致更大的损失，是一项保障食用菌菌种的纯度与质量，实现食用菌优质、稳产、高产的重要技术措施之一。

在食用菌生产中，许多企业、农户由于缺乏相应的检测防控方法，导致食用菌菌种的潜伏污染不能被事先发现，还误以为是在本级食用菌菌种或栽培菌瓶(包)生产过程中的灭菌、接种和培养环节不慎所致。我们经大量的调查分析发现，食用菌菌种的细菌隐性潜伏污染是杂菌传播的重要途径之一，污染细菌的种类主要有枯草杆菌(Bacillus-subitilis)、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)、假单孢杆菌(Pseudomonas spp)、黄单孢杆菌(Xanthomonas spp)、欧文氏杆菌(Erwinnia spp)等，是目前我国食用菌生产中存在的主要问题之一。由于潜伏污染的细菌携带量往往不大，并且存在隐蔽性，因此，研发开发一种快速高效的杂菌探测提取和培养检测的方法，是当前食用菌生产中迫切期待解决的问题。

发明内容

本发明目的是，针对目前食用菌生产行业中食用菌菌种易被细菌潜伏污染，而又缺乏检测防控有效方法的问题，提供一种能快速高效探测提取潜伏细菌的方法；二是提供一种能快速高效对提取物进行是否含细菌潜伏污染的培养检测方法，以保障食用菌菌种的纯度与质量，为食用菌的优质、稳产、高产提供技术支持。

本发明目的通过以下技术方案来实现：

一种用于检测食用菌菌种潜伏污染细菌的探测取样棒，该探测取样棒由棒体、凹孔或凹槽、手柄组成；其中，棒体由竹、木、塑料或钢材制备而成，其长度较插入取样的食用菌菌种袋或食用菌菌种瓶长60mm，其下端为圆钝角，上端稍扁大为手柄；竹、木或塑料质棒体的直径为5-6mm，该棒体自距下端10-15mm处开始至离手柄端6cm处为止，每间隔20mm冲制一直径为1.5-2mm、深0.5-1mm的凹孔；钢质棒体其直径为2-3mm，棒体上按同上方法冲制深0.3-0.4mm、宽0.4-0.5mm的倒刺状凹槽。

一种检测食用菌菌种潜伏污染细菌的液体培养基，该培养基的组分与各组分在每升中的克含量为：

配制时，先将非溶性的玉米芯、麸皮与麦芽粉称量、煮汁、过滤后，再加入其余可溶性组分，经加热溶解、过滤、定容至1000ml、分装、灭菌、冷却而成；

一种优化的检测木腐型金针菇、杏鲍菇、海鲜菇、秀珍菇、香菇及黑木耳食用菌菌种潜伏污染细菌的液体培养基，其组分与各组分在每升中的克含量为：

一种优化的检测草腐型双孢蘑菇及双环蘑菇食用菌菌种潜伏污染细菌的液体培养基，其组分与各组分在每升中的克含量为：

所述的麦芽粉是由小麦发芽至芽长30-40mm，经烘/晒干后磨碎成粉而制成。

食用菌菌种潜伏污染细菌的检测方法，该方法按如下步骤进行：

(1)检测食用菌菌种潜伏污染细菌液体培养基的制备：按上述的液体培养基的配方称取麸皮、玉米芯或麦芽粉，在1000ml水中煮沸，文火煮15分钟后过滤，取滤汁后加入配方中的其它组分，加热搅拌至溶解，过滤后加水定容至1000ml，分装入100ml三角瓶中至每瓶50ml，经高压灭菌、冷却后备用；