[发明专利]一种提取竹叶黄酮的方法

说明书

(一)技术领域

本发明涉及植物提取技术领域，特别涉及到应用机械化学技术提取竹叶黄酮的方法。

(二)背景技术

黄酮类化合物具有广泛的药理活性，分布广泛，种类繁多，是天然产物中一类重要的化合物。竹叶黄酮是竹叶提取物的主要活性成分之一，在竹叶中的含量占1-2％，主要以荭草苷、异荭草苷、牡荆苷和异牡荆苷等黄酮碳苷为主，同时，还含有木犀草素、芹菜素等黄酮苷元。与氧苷黄酮相比，竹叶黄酮结构稳定、不易降解、食用安全性强。因具备较强的自由基清除能力，从而具有良好的消炎、抗菌、降血脂、抗辐射、抗癌、抗衰老、改善心血管系统和脑神经系统等功能。因此，在食品添加剂、天然药物、功能性食品及护肤化妆品等领域市场前景广阔。

竹叶黄酮的传统提取方法以有机溶剂提取法为主，提取率高，提取成本也较高，且提取溶液含有叶绿素等杂质，后处理繁琐。近年来以总黄酮为主要成分的竹叶提取物逐步实现产业化。专利CN102068630A以水为提取溶剂，在60-100℃下提取1-3小时，再冷却浸提2-5小时，滤液经大孔树脂层析纯化，干燥后所得产品中竹叶总黄酮的含量达到30～50％。该方法提取时间较长，提取率较低。专利CN101921345A公开了一种采用挤压法提取竹叶多糖和黄酮的方法，该方法溶剂使用量少、快速，但也存在目标产物提取不完全、提取温度较高等问题。

机械化学是研究物质在机械力诱发和作用下发生的物理化学性质和结构变化的一门学科。机械化学技术是利用机械能来破坏物质的内结合力，使其产生新的界面，并在局部区域产生物理化学反应。如：晶型改变、溶解性改变、物理和化学吸附性能改变、外来离子进入晶体结构，引起化学组成改变、分子间的作用力增强，生成复合分子等。利用机械化学效应，将动植物原料与固相试剂共研磨，可以实现动植物有效成分的高效提取。该提取技术的特点是：动植物原料受机械力作用而被粉碎时，颗粒尺寸变小，细胞壁被破坏，有效成分大量释放；目标产物与固相试剂生成易溶于水的复合分子，通过加水室温溶解，实现高效提取及与其他冷水不溶性杂质的粗分离。提取过程无需有机溶剂，提取率和产品质量都较好。该技术是一种高效、环保的提取方法，有望取代传统提取法。目前还未见应用机械化学技术提取竹叶总黄酮的报道，该法将有利于植物酚酸、生物碱、黄酮和多糖等有效成分的传统提取工艺的改造。

(三)发明内容

本发明的主要目的是克服现有竹叶黄酮提取工艺中存在的提取率较低、时间较长、使用有机溶剂、提取杂质较多等问题，提供一种高效、简单、成本较低、并易于工业化生产的竹叶黄酮提取工艺，促进黄酮类天然抗氧化剂的开发和利用。

本发明应用机械化学技术提取竹叶黄酮，其基本原理是：利用机械化学效应，将干燥竹叶与固相试剂共研磨粉碎，植物细胞壁在反复应力作用下破裂，释放出黄酮酚酸等有效成分，并与固相试剂反应生成易溶于水的盐类复合分子。加水溶解，即可在常温下快速、高效地提取出黄酮类复合物，而诸如叶绿素、多糖、蛋白质、生物碱等杂质则不能被提取出来。最后，酸化即得竹叶总黄酮。

本发明采用的技术方案如下：

一种提取竹叶黄酮的方法，所述方法为：将干燥竹叶与固相试剂都投入球磨机中研磨均匀，取出球磨粉末，向所述球磨粉末中加入水，搅拌均匀，过滤，得滤液A，滤液A浓缩至所述滤液体积的1/4～1/8，加入无机酸调pH值至2.0～7.0，优选为4.0～6.0；过滤，得滤液B，滤液B过大孔树脂层析柱，先用水洗脱除盐等杂质，再以50％～80％的乙醇水溶液为洗脱剂洗脱，收集洗脱液，浓缩蒸去溶剂，干燥，得到竹叶黄酮提取物；所述的固相试剂为氢氧化钠、碳酸氢钠、碳酸钠、氢氧化钾、碳酸氢钾、碳酸钾、氢氧化钙、碳酸钙、磷酸氢二钠、氯化钠、硫酸钠、硅胶或硼砂中的一种或两种以上的任意组合；所述干燥竹叶与固相试剂的质量比为5～25∶1；所述球磨粉末与所加入的水的质量比为1∶10～35；所述的无机酸为盐酸、冰醋酸或磷酸的水溶液；所述的大孔树脂为非极性或弱极性树脂。

本发明所述的干燥竹叶是指禾本科竹类植物的干燥叶，如刚竹属淡竹(Phyllostachys glauca)、毛竹(Phyllostachys heterocycla cv.Pubescens)和紫竹(Phyllostachys nigra)及簕竹属孝顺竹(Bambusa multiplex)的干燥叶。

进一步，本发明所述球磨机的转速为500～2500rpm，优选为1000～2000rpm。

本发明所述的球磨时间为5～30min，优选为10～20min。