[发明专利]环烯醚萜类化合物在制备抗骨质疏松药物中的应用

权利要求书

1.通式为Ⅰ的环烯醚萜类化合物在制备治疗和/或预防骨质疏松症药物中的应用

Ⅰ。 

2.根据权利要求1所述环烯醚萜类化合物的应用，其特征在于，所述R₁为-H或

。

3.根据权利要求1或2所述女贞子中环烯醚萜类化合物的应用，其特征在于，所述R₂为

。

4.根据权利要求1或2所述环烯醚萜类化合物的应用，其特征在于，所述R₃为-OH。

5.根据权利要求1或2所述环烯醚萜类化合物的应用，其特征在于，所述通式为Ⅰ的环烯醚萜类化合物分离自女贞子中的环烯醚萜类化合物。

6.根据权利要求5所述环烯醚萜类化合物的应用，其特征在于，所述通式为Ⅰ的环烯醚萜类化合物为特女贞苷或女贞苷G13。

7.根据权利要求5所述环烯醚萜类化合物的应用，其特征在于，所述女贞子中用于制备治疗和/或预防骨质疏松症药物的化合物的测定方法包括下述步骤：

（1）将干燥的女贞子药材经粉碎后用水加热提取，减压浓缩除去水后得到浸膏，即女贞子水提物，将女贞子水提物悬浮于40~55℃热水中，然后依次用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，分别浓缩萃取液得浸膏：氯仿部分（A），乙酸乙酯部分（B），正丁醇部分（C），水层（D）；以ALP活性作为评价其是否具有促成骨细胞分化能力的指标，用DMSO作为空白对照，雌二醇E2作为阳性对照，测定女贞子水提物及萃取后A、B、C、D各部分对UMR-106细胞分化的影响，选择促成骨细胞分化能力最强的D部分进行下一步分析；

（2）女贞子水提物萃取后水层（D）上大孔树脂柱，经水、20%乙醇、40%乙醇、60%乙醇、95%乙醇梯度洗脱，分成对应的5个部分D1-D5，以ALP活性作为评价其是否具有促成骨细胞分化能力的指标，用DMSO作为空白对照，E2作为阳性对照，测定D1-D5部分对UMR-106细胞ALP活性的影响，选择促成骨细胞分化能力最强的D2部分进行下一步分析；

（3）活性最强的20%乙醇洗脱部分（D2）用少量水溶解分散后加入甲醇至含甲醇浓度为95%，静置过夜；滤液蒸干得浸膏D21，D21上硅胶层析柱，分别用10:1，5:1，3:1，1:1，1:4，0:1的氯仿-甲醇各1000mL进行梯度洗脱，根据薄层层析情况将其分成标识为Fr.1-6的6段，Fr.1部分上硅胶层析柱，分别用10:1，5:1，3:1，1:1，0:1的氯仿-丙酮各100mL进行梯度洗脱，根据薄层情况合并将其分成标识为Fr.1.1-1.3的3段，Fr.1.1经纯化得化合物2，Fr.1.2经纯化得化合物1，Fr.1.3经纯化得化合物3；Fr.2经纯化得化合物5和6，Fr.3上硅胶层析柱分别用20:1，10:1，5:1，3:1，1:1，0:1氯仿-甲醇各500mL进行梯度洗脱，根据薄层层析情况将其分成标识为Fr.3.1-3.3的3段，Fr.3.3经纯化得化合物4；Fr.4用C₁₈柱层析，10:90的甲醇-水洗脱得化合物7；Fr.5上硅胶层析柱，分别用5:1，3:1，1:1，0:1氯仿-甲醇各1000mL进行梯度洗脱，根据薄层层析情况将其分成标识为Fr.5.1-5.3的3段，Fr.5.2经纯化得化合物8；

（4）鉴定步骤（3）中1-8化合物的波谱数据，通过波谱数据确定1-8化合物的化学结构，并通过ALP活性检测对比试验确定女贞子中用于制备治疗和/或预防骨质疏松症药物的化合物。