[发明专利]海水盾纤毛虫体外活体培养培养基的制备及培养方法

权利要求书

1.一种海水盾纤毛虫活体培养基的制备方法，其特征在于它的制备过程是：

a.剪取健康牙鲆鱼或大菱鲆鱼的脑组织和肌肉组织，将两者按照质量比1∶1～3∶1的比例混合后，加入经滤膜过滤后的灭菌海水体积为V₁，用组织匀浆机制备成肉泥；

b.在肉泥中加入经滤膜过滤后的灭菌海水体积为V₂，肉泥与两次加入的海水总体积的质量体积比为1∶45～1∶55，振荡均匀后置于密封、无菌的玻璃容器中，65～70℃水浴2～3小时后制备成盾纤毛虫活体培养基，制备好的盾纤毛虫活体培养基放置在4℃条件下长期保存。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于所述的用于过滤海水的滤膜为孔径0.22μm的混合纤维素滤膜。

3.根据权利要求1或2所述方法制备的一种海水盾纤毛虫活体培养基。

4.一种海水盾纤毛虫的体外活体培养方法，其特征在于它的方法步骤是：

a.剪取感染盾纤毛虫病的养殖动物部分病灶组织，无菌操作在玻璃培养皿中剪碎后，滴入15～20倍体积的经滤膜过滤后的灭菌海水，置于18～20℃恒温培养箱内静置2～4个小时；

b.在解剖镜下用无菌胶头滴管吸取静置后的培养皿内液体中游离的虫体，滴入装有15～30ml制备好的盾纤毛虫培养基的玻璃培养皿中，置于18～20℃恒温培养；

c.每隔20～24小时，吸取5～10ml培养液转移至另一装有15～30mL新鲜的盾纤毛虫培养基的玻璃培养皿中，轻轻晃动数次混合均匀后，再将其置于18～20℃恒温培养箱继续培养，以此实现活虫体长期培养的目的。

5.根据权利要求4所述方法，其特征在于所述的用于过滤海水的滤膜为孔径0.22μm的混合纤维素滤膜。