[发明专利]用于检测裂谷热病毒S片段的引物和探针有效
| 申请号： | 201110415602.X | 申请日： | 2011-12-13 |
| 公开（公告）号： | CN102433392A | 公开（公告）日： | 2012-05-02 |
| 发明（设计）人： | 王彩霞;林祥梅;吴绍强;邓俊花 | 申请（专利权）人： | 中国检验检疫科学研究院 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王朋飞;王加岭 |
| 地址： | 100123 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 检测 裂谷 病毒 片段 引物 探针 | ||
1.用于检测裂谷热病毒S片段的引物和探针，其特征在于，
上游引物RVFVU1：5’-GGATTACTTTCCTGTGATATCTGTTG-3’，
下游引物RVFVL1：5’-GTATCCTGGGAGGRCCATCWC-3’，其中R为A或G，W为T或A。
2.用于检测裂谷热病毒S片段的探针，其特征在于，探针为：5’-F1-ACTCCACTGACACAACACGACGACCACT-Q1-3′，其中F1为报告荧光基团，Q1为淬灭荧光基团。
3.检测裂谷热病毒的荧光RT-PCR法，其特征在于，以裂谷热病毒的RNA为模板，采用权利要求1所述的引物和权利要求2所述的探针进行荧光RT-PCR反应。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，25μL的反应体系含有成分如下：10×PCR缓冲液(Mg2+)2.5μL；2.5mM MgCL2 5.0μL；2.5mM dNTP 2.5μL；反转录酶AMV 2.5U；Rnase抑制剂20U；10μMRVFVU1 0.5μL；10μM RVFVL1 0.5μL，10μM RVFVP1 0.5μL，rTaq聚合酶2.5U；RNA模板1.6×10-6～1.6×10-1ng，余量为双蒸水；
反应程序为：50℃反转录30min；95℃预变性5min；95℃变性10s，47℃退火20s，45个循环。
5.用于检测裂谷热病毒S片段的试剂盒，其包括权利要求1所述的引物和权利要求2所述的探针。
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