[发明专利]一种基于溶剂萃取耦合FTIR快速分析磷脂的方法

权利要求书

1.一种基于溶剂萃取耦合FTIR快速分析磷脂的方法，其特征在于所述方法为：(1)将含200～5000ppm磷脂的油脂A用有机溶剂A萃取后，取上层萃取液A，在波谱范围4000～400cm^-1检测红外波谱，记为S_5；所述有机溶剂A为乙腈、DMSO、甲醇、乙醇中的一种或一种以上的混合；(2)另外取与油脂A相同的油脂B，油脂B经硅胶柱处理后获得脱胶油B，将脱胶油B用有机溶剂B萃取，取上层萃取液B，在波谱范围4000～400cm^-1检测红外波谱，记为S_4；所述有机溶剂B与有机溶剂A相同；(3)对S_4和S_5进行差谱分析，得到差谱S_6的二阶导数图谱S_7，读取二阶导数图谱S_7在4000～400cm^-1范围各特征峰的吸收强度，根据磷脂标准曲线获得油脂A中磷脂的浓度。

2.如权利要求1所述基于溶剂萃取耦合FTIR快速分析磷脂的方法，其特征在于所述有机溶剂A、有机溶剂B均为乙腈和甲醇以体积比1∶0.25～9的混合液。

3.如权利要求2所述基于溶剂萃取耦合FTIR快速分析磷脂的方法，其特征在于所述有机溶剂A、有机溶剂B均为乙腈与甲醇以体积比的1∶1.5混合液。

4.如权利要求1所述基于溶剂萃取耦合FTIR快速分析磷脂的方法，其特征在于步骤(1)所述油脂A与有机溶剂A体积比为1∶0.5～12。

5.权利要求1所述基于溶剂萃取耦合FTIR快速分析磷脂的方法，其特征在于步骤(2)所述的硅胶柱处理为：将油脂B置于硅胶层析柱中，真空吸附，收集流出液，得到油脂B的脱胶油。

6.如权利要求1所述基于溶剂萃取耦合FTIR快速分析磷脂的方法，其特征在于步骤(3)所述差谱分析是在特征峰1241cm^-1处进行差谱分析。

7.如权利要求1所述基于溶剂萃取耦合FTIR快速分析磷脂的方法，其特征在于所述方法按以下步骤进行：(1)将含200～5000ppm磷脂的油脂A用有机溶剂A萃取后，取上层萃取液A，采用25μmCaF₂样品池，扫描次数32，在分辨率0.5cm^-1，波谱范围4000～400cm^-1条件下记录波谱，记为S_5；所述有机溶剂A为乙腈与甲醇以体积比的1∶1.5混合液；(2)另外取与油脂A相同的油脂B，油脂B经硅胶柱脱磷脂处理后获得脱胶油B，将脱胶油B用有机溶剂B萃取，取上层萃取液B，采用25μmCaF₂样品池，扫描次数32，在分辨率0.5cm^-1，波谱范围4000～400cm^-1条件下记录波谱，记为S_4；所述有机溶剂B与有机溶剂A相同；(3)对S_4、S_5在特征峰1241cm^-1处进行差谱分析，即S_5-S_4得到差谱S_6，对差谱S_6进行二阶求导并放大-10000倍，得到差谱S_6的二阶导数图谱S_7，读取二阶导数图谱S_7在特征峰1241cm^-1处的吸收强度；以含20～5000ppm的磷脂有机溶剂C溶液作为标准品，以有机溶剂C为参照，在上述相同条件下测试波谱，并绘制标准曲线，根据标准曲线获得油脂A中磷脂浓度；所述有机溶剂C与有机溶剂A相同。

8.如权利要求1或7所述基于溶剂萃取耦合FTIR快速分析磷脂的方法，其特征在于所述标准曲线的绘制方法为：①将有机溶剂C采用25μmCaF₂样品池，扫描次数32，在分辨率0.5cm^-1、波谱范围4000～400cm^-1条件下记录有机溶剂C的原始波谱，记为S_0；②分别取磷脂添加至有机溶剂C中，制得浓度范围在20～5000ppm的磷脂标准溶液，采用25μmCaF₂样品池，扫描次数32，在分辨率0.5cm^-1、波谱范围4000～400cm^-1条件下记录不同磷脂浓度标准溶液的波谱，分别记为波谱S_std_1～S_std_n，n为大于1的自然整数；③对波谱S_0和系列波谱S_std_1～S_std_n在特征峰处进行差谱分析，得到不同磷脂浓度下标准溶液的系列差谱D_1～D_n，n为大于1的自然整数，对系列差谱D_1～D_n进行二阶求导并放大-10000倍，得到系列差谱D_1～D_n的系列二阶导数图谱S_2^nd_1～S_2^nd_n，n为大于1的自然整数，读取系列二阶导数图谱S_2^nd_1～S_2^nd_n中不同磷脂浓度标准溶液的各特征峰的吸收强度，以最大吸收峰强度为横坐标、标准磷脂含量为纵坐标，绘制标准曲线。