[发明专利]一种山麦冬皂苷B的分离纯化方法有效
申请号: | 201110420119.0 | 申请日: | 2011-12-15 |
公开(公告)号: | CN102399259A | 公开(公告)日: | 2012-04-04 |
发明(设计)人: | 李启发;郭建华;夏柯;文焕松;刘丁 | 申请(专利权)人: | 成都普思生物科技有限公司 |
主分类号: | C07J71/00 | 分类号: | C07J71/00 |
代理公司: | 成都天嘉专利事务所(普通合伙) 51211 | 代理人: | 赵丽 |
地址: | 610045 四川*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 麦冬 皂苷 分离 纯化 方法 | ||
1.一种山麦冬皂苷B的分离纯化方法,其特征在于具体工艺步骤如下:
A.乙醇提取:取湖北山麦冬地下部位1kg,一次加入50%-70%的乙醇溶液8-12L,回流提取3-5次,每次1.5-3小时,保持微沸,过滤药渣后,合并提取液;
B.大孔树脂富集除杂:将步骤A的提取液减压浓缩至密度1.20-1.40后上大孔树脂柱层析,先后用水5-8 BV、20%-30%乙醇8-10 BV淋洗除杂,淋洗至流出液变清后,改用60%-70%乙醇4-8 BV洗脱,然后薄层层析在线检测流出液,并收集该60%-70%的乙醇洗脱液流份,共收集6个柱体积;
C.硅胶柱层析色谱分离:将步骤B收集到的乙醇洗脱液减压后,进行硅胶柱层析分离,洗脱时先用氯仿-甲醇-水体积比为10:1:0.05的混合溶剂8-10BV除杂,用同一溶剂继续洗脱,收集10-15BV的洗脱液;
D.重结晶:将步骤C收集到的洗脱液用50%-80%的甲醇溶解后进行重结晶,培养晶体时间为5-10小时;然后抽滤,滤饼用70%-90%甲醇洗涤后,真空干燥,得到山麦冬皂苷B含量达98%以上的白色固体产品。
2.如权利要求1所述山麦冬皂苷B的分离纯化方法,其特征在于步骤B所述薄层层析的展开剂为氯仿:甲醇:水=100:35:5。
3.如权利要求1所述山麦冬皂苷B的分离纯化方法,其特征在于步骤B所述大孔树脂为D101型或AB-8型。
4.如权利要求1所述山麦冬皂苷B的分离纯化方法,其特征在于步骤C所述混合溶剂是:按体积比为氯仿-甲醇-水为10:1:0.05。
5.如权利要求1所述山麦冬皂苷B的分离纯化方法,其特征在于步骤D所述重结晶的溶剂还可以用乙醇、乙酸乙酯或正丁醇中的任意一种替代。
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