[发明专利]抗HIV的药物靶点及其在制药中的用途

权利要求书

1.一种HIV病毒药物靶点，其特征在于，该药物靶点针对病毒的Vif蛋白与宿主细胞CBFβ蛋白之间的相互结合位点；该结合位点包括CBFβ的Helix4和Loop3，以及Vif的N端的前98个氨基酸以及第144，145，146位（SLQ）氨基酸。

2. 根据权利要求1所述的HIV病毒药物靶点，其特征在于：优选位点是Vif第21位氨基酸或第38位氨基酸。

3. 一种抗HIV-1病毒的多克隆抗体，其特征在于是以Vif N端前98个氨基酸范围内的多肽或针对SLQ位点为抗原表位的多克隆抗体，具有抑制HIV-1 Vif和CBFβ结合的能力。

4. 权利要求3所述抗HIV-1病毒的多克隆抗体的制备方法，步骤包括：

1）提供序列在Vif N端前98个氨基酸范围内的多肽或序列以SLQ位点为抗原表位的多肽；

2）将多肽与载体蛋白偶联，并与佐剂一起免疫动物；

3）取动物的抗血清，经过抗原偶联的亲和层析柱纯化，即得所述多克隆抗体。

5. 一种抗HIV-1病毒的单克隆抗体，其特征在于是以Vif N端前98个氨基酸范围内的多肽或针对SLQ位点为抗原表位的单克隆抗体，具有抑制HIV-1 Vif和CBFβ结合的能力。

6. 权利要求5所述抗HIV-1病毒的单克隆抗体的制备方法，步骤包括：

1）提供序列在Vif N端前98个氨基酸范围内的多肽或序列以SLQ位点为抗原表位的多肽；

2）将多肽与载体蛋白偶联，并与佐剂一起免疫小鼠；

3）分离小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞株融合；

4）加入小鼠腹腔饲养细胞与融合细胞共培养，并筛选阳性株；

5）克隆化筛选，即可获得单克隆抗体细胞株。

7. 一种HIV病毒抑制剂，该病毒抑制剂能够有效阻止Vif－CBFβ相互结合，从而抑制HIV病毒复制。

8. 权利要求7所述HIV病毒抑制剂的筛选方法，包括以下步骤：

1）通过生物信息学手段模拟Vif和CBFβ的结合界面，根据模拟信息建立结合界面的模型，并以此模型为限制条件从MDDR,NCI,ACD等数据库中筛选得到符合模型的小分子；最后通过DOCK对接以及手动筛选，根据结合模式,结构合理性,可获得性得到最终的候选分子进行生物学筛选；

2）生物学筛选包括以下几方面：

A）免疫共沉淀检测候选分子对Vif－CBFβ相互结合的干扰能力；

B）Magi方法验证药物抑制HIV的能力；

C ）MTT法检测药物毒性；

D）得到能够有效阻止Vif－CBFβ相互结合的抗HIV病毒抑制剂。

9.权利要求1或2所述的HIV-1 Vif和CBFβ结合位点为靶点的抗HIV药物可以是小分子化合物、中药、植物药提取物、有效部位或有效成分、核酸类如RNAi、多肽类或蛋白质类药物。