[发明专利]马动脉炎病毒的液相芯片检测引物及检测方法无效
申请号: | 201110426985.0 | 申请日: | 2011-12-19 |
公开(公告)号: | CN102424865A | 公开(公告)日: | 2012-04-25 |
发明(设计)人: | 郑小龙;徐彪;梁成珠;王群;朱来华;邓明俊;岳志芹;肖西志;赵玉然 | 申请(专利权)人: | 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/93 |
代理公司: | 青岛海昊知识产权事务所有限公司 37201 | 代理人: | 张中南 |
地址: | 266002 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 动脉炎 病毒 芯片 检测 引物 方法 | ||
1.一种马动脉炎病毒的液相芯片检测的引物和探针,其特征在于,引物和探针的核酸序列如下:
正向引物:SEQ ID NO:1
反向引物:`SEQ ID NO:2
探针:`SEQ ID NO:3。
2.如权利要求1所述的引物和探针,其特征在于所述的正向引物和反向引物5’端进行生物素标记;探针的5’端进行氨基化修饰。
3.一种液相芯片检测马动脉炎病毒的方法,其特征在于,是用权利要求2所述的引物和探针进行检测。
4.如权利要求3所述的方法,其特征在于包括有:1)检测样品RNA的提取、2)RT-PCR扩增目的片段、3)寡核苷酸探针与微球共价偶联、4)探针与RT-PCR扩增片段杂交和5)液相芯片仪分析步骤。
5.如权利要求4所述的方法,其特征在于所述的步骤2)RT-PCR反应的循环条件为:
第一阶段,反转录50℃:30min;
第二阶段,预变性94℃:3min;
第三阶段,扩增94℃:30s,59℃:30s,72℃:30s,30个循环;
第四阶段,延伸72℃:5min。
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