[发明专利]高青蒿素含量转基因青蒿植株的生产方法无效

专利信息
申请号: 201110430810.7 申请日: 2011-12-20
公开(公告)号: CN102776212A 公开(公告)日: 2012-11-14
发明(设计)人: 唐克轩;陆续;张凌;沈乾;高尔娣;江伟民;张芳源;吕宗友 申请(专利权)人: 上海交通大学
主分类号: C12N15/52 分类号: C12N15/52;C12N15/82;C12Q1/68;A01H5/00;G01N30/02
代理公司: 上海汉声知识产权代理有限公司 31236 代理人: 郭国中
地址: 200240 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 青蒿素 含量 转基因 青蒿 植株 生产 方法
【权利要求书】:

1.一种高青蒿素含量转基因青蒿植株的生产方法,其特征在于,包括如下步骤:从青蒿中克隆ADS,CYP71AV1和CPR三个基因,构建含ADS,CYP71AV1和CPR三基因的植物表达载体,用根癌农杆菌介导,将ADS,CYP71AV1和CPR三基因转入青蒿并再生出植株,筛选,获得青蒿素含量提高的转基因青蒿植株。

2.如权利要求1所述的高青蒿素含量转基因青蒿植株的生产方法,其特征在于,所述筛选包括如下步骤:PCR检测外源目的基因ADS,CYP71AV1和CPR三基因的整合情况,高效液相色谱法及蒸发光散射检测器测定转基因青蒿中青蒿素的含量。

3.如权利要求2所述的高青蒿素含量转基因青蒿植株的生产方法,其特征在于,所述PCR检测为:设计合成35S和ADS,CYP71AV1和CPR基因的引物,进行DNA扩增,紫外线下观察到目的条带的株系即为转基因青蒿植株。

4.如权利要求2所述的高青蒿素含量转基因青蒿植株的生产方法,其特征在于,所述高效液相色谱法及蒸发光散射检测器测定青蒿植株中青蒿素含量,测定条件为:色谱柱C-18反相硅胶柱,流动相为甲醇∶水,甲醇∶水的体积比为70∶30,柱温为30℃,流速1.0mL/min,进样量10μL,蒸发光散射检测器漂移管温度40℃,放大系数为7,载气压力5bar。

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