[发明专利]检测或辅助检测II类细菌素产生菌群体感应信号肽的方法有效
申请号: | 201110431610.3 | 申请日: | 2011-12-21 |
公开(公告)号: | CN103173513A | 公开(公告)日: | 2013-06-26 |
发明(设计)人: | 李平兰;张香美;张宝;刘丽莎 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
主分类号: | C12Q1/02 | 分类号: | C12Q1/02 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;任凤华 |
地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 辅助 ii 细菌 产生 群体 感应 信号肽 方法 | ||
1.检测或者辅助检测来源于II类细菌素产生菌代谢物的待检测肽是否含有II类细菌素产生菌群体感应信号肽或是否为II类细菌素产生菌群体感应信号肽的方法,包括如下步骤:
先将II类细菌素产生菌接种于液体改良脱脂乳培养基中培养,在到达稳定期之前的这一时间段中的任一时刻,向所述液体改良脱脂乳培养基中添加所述待检测肽,继续培养至10-16h,得到培养物;检测所述培养物中是否存在所述II类细菌素,按照如下方法确定所述待检测肽是否含有II类细菌素产生菌群体感应信号肽或是否为II类细菌素产生菌群体感应信号肽:若所述培养物中存在所述II类细菌素,则所述待检测肽含有或候选含有II类细菌素产生菌群体感应信号肽,或所述待检测肽为或候选为II类细菌素产生菌群体感应信号肽;反之,则所述待检测肽不含有或候选不含有所述II类细菌素产生菌的群体感应信号肽,或所述待检测肽不为或候选不为所述II类细菌素产生菌的群体感应信号肽;所述II类细菌素产生菌产生II类细菌素受群体感应系统调控;所述待检测肽来源于将所述II类细菌素产生菌在产生II类细菌素状态下进行发酵得到的发酵上清液;所述改良脱脂乳培养基是在脱脂乳培养基中添加酵母浸粉得到的培养基,在所述改良脱脂乳培养基中,所述酵母浸粉、脱脂乳与水的配比为0.5g∶(8-12g)∶100ml。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述发酵上清液是按照包括如下步骤的方法获得的:将所述II类细菌素产生菌接种于能使所述II类细菌素产生菌产生II类细菌素的培养基中培养至稳定期,如稳定期末期,,收集得到所述发酵上清液。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:所述发酵上清液是按照包括如下步骤的方法获得的:将所述II类细菌素产生菌接种于MRS培养基中培养至稳定期,如稳定期末期,收集得到所述发酵上清液。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:所述发酵上清液是按照包括如下步骤的方法获得的:将所述II类细菌素产生菌以体积百分比0.5~1%,或体积百分比0.5%的接种量接种到MRS培养基中,30~37℃培养10-48h,或37℃培养10-48h,或37℃培养24h后,收集获得含有所述待检测肽的所述发酵上清液。
5.根据权利要求1-4中任一所述的方法,其特征在于:所述II类细菌素产生菌为乳酸菌。
6.根据权利要求5中任一所述的方法,其特征在于:所述II类细菌素产生菌为乳杆菌。
7.根据权利要求6中任一所述的方法,其特征在于:所述II类细菌素产生菌为戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)31-1。
8.检测II类细菌素产生菌群体感应信号肽的培养基,为改良脱脂乳培养基,其特征在于:所述改良脱脂乳培养基是在脱脂乳培养基中添加酵母浸粉得到的培养基;在所述改良脱脂乳培养基中,所述酵母浸粉、脱脂乳与水的配比为0.5g∶(8-12g)∶100ml。
9.根据权利要求8所述的培养基,其特征在于:在所述改良脱脂乳培养基中,所述酵母浸粉、脱脂乳与水的配比为0.5g∶11g∶100ml。
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