[发明专利]诱导可逆性永生化前成牙本质细胞系及其建立方法

权利要求书

1.一种融合蛋白，其包括至少一个蛋白A，所述蛋白A能够作用于细胞核内核酸或蛋白，以及至少一个与蛋白A相融合的蛋白B，所述蛋白B无法进入细胞核，并且蛋白B可控脱落。

2.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述可控脱落包括受药物调控脱落、受温度调控脱落或受光处理调控脱落。

3.根据权利要求1或2所述的融合蛋白，其特征在于，所述蛋白A为Cre酶。

4.根据权利要求1或2所述的融合蛋白，其特征在于，所述蛋白B为雌激素受体蛋白。

5.根据权利要求3所述的融合蛋白，其特征在于，所述Cre酶的两端分别结合一雌激素受体蛋白。

6.编码权利要求1~5任一项所述融合蛋白的基因。

7.含有权利要求6所述基因的表达载体。

8.一种细胞系，其能表达权利要求1~5任一项所述的融合蛋白。

9.根据权利要求8所述的细胞系，其特征在于，其含有权利要求6所述的基因或权利要求7所述的表达载体。

10.诱导可逆性永生化细胞系，其特征在于，该细胞系引入了致永生化基因，在该基因的两端具有LoxP序列，该细胞系还表达权利要求4或5所述的融合蛋白。

11.根据权利要求10所述的细胞系，其特征在于，所述细胞系为前成牙本质细胞。

12.根据权利要求11所述的细胞系，其特征在于，所述细胞系为小鼠前成牙本质细胞系。

13.根据权利要求10~12任一项所述的细胞系，其特征在于，其含有质粒pCAGER^T2CreER^T2-neo。

14.根据权利要求13所述的细胞系，其特征在于，所述质粒pCAGER^T2CreER^T2-neo的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

15.一种构建权利要求10~14任一项所述细胞系的方法，其特征在于，表达Cre酶与雌激素受体蛋白的融合蛋白的表达载体导入永生化细胞系中，得到可逆性永生化细胞系，所述永生化细胞系引入了致永生化基因，在该基因的两端具有LoxP序列。