[发明专利]一种杨树单倍体培育方法有效
申请号: | 201110440337.0 | 申请日: | 2011-12-26 |
公开(公告)号: | CN102550405A | 公开(公告)日: | 2012-07-11 |
发明(设计)人: | 安新民;李英 | 申请(专利权)人: | 北京林业大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 北京元本知识产权代理事务所 11308 | 代理人: | 叶凡 |
地址: | 100083 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 杨树 单倍体 培育 方法 | ||
1.一种杨树单倍体培育方法,包括如下顺序进行的步骤:
1)将消毒处理后的杨树花药接种在愈伤组织诱导培养基上进行愈伤组织诱导培养,获得杨树愈伤组织;
2)将杨树愈伤组织接种于不定芽分化培养基上进行不定芽的分化培养,获得杨树不定芽;
3)将杨树不定芽接种于生根培养基上进行生根培养,获得试管小苗;
4)经过倍性鉴定,获得杨树单倍体植株。
2.如权利要求1所述的杨树培育方法,其特征在于:所述的杨树是北京杨(Populus beijingensis)。
3.如权利要求1所述的杨树培育方法,其特征在于:所述杨树花药是发育时期为小孢子处于单核靠边期的杨树花药。
4.如权利要求1所述的杨树培育方法,其特征是步骤1)中所述愈伤组织诱导培养基是:H基本培养基+奈乙酸0.5-1.0mg/L+6-糠氨基嘌呤0.5-1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂5.5g/L;优选为:H基本培养基+奈乙酸1.0mg/L+6-糠氨基嘌呤0.5-1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂5.5g/L;更优选为:H基本培养基+奈乙酸1.0mg/L+6-糠氨基嘌呤1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂5.5g/L。
5.如权利要求1所述的杨树培育方法,其特征是步骤1)中所述愈伤组织诱导培养在以下条件下进行:黑暗条件下,培养温度为25±1℃。
6.如权利要求1所述的杨树培育方法,其特征是步骤2)中所述不定芽分化培养基是:MS培养基+6-苄基腺嘌呤0.6mg/L+奈乙酸0.2mg/L+赤霉素0.02-0.2mg/L+蔗糖20g/L+琼脂5.5g/L;优选为:MS培养基+6-苄基腺嘌呤0.6mg/L+奈乙酸0.2mg/L+赤霉素0.02mg/L+蔗糖20g/L+琼脂5.5g/L。
7.如权利要求1所述的杨树培育方法,其特征是步骤2)中所述不定芽分化培养在以下条件下进行:培养温度为25±1℃,光照1500~2000lx,光照时间16小时/天。
8.如权利要求1所述的杨树培育方法,其特征是步骤3)中所述生根培养基是:1/2MS培养基+吲哚丁酸0.2-0.5mg/L+蔗糖20g/L+琼脂5.5g/L;优选为:1/2MS培养基+吲哚丁酸0.3mg/L+蔗糖20g/L+琼脂5.5g/L。
9.如权利要求1或2所述的杨树培育方法,其特征是步骤4)中所述生根培养在以下条件下进行:培养温度为25±1℃,光照1500~2000lx,光照时间16小时/天。
10.如权利要求1所述的杨树培育方法,其特征是步骤1)中所述消毒处理包括如下步骤:
1-A)用毛笔轻刷花芽鳞片表面后用无菌水冲洗花芽;
1-B)用酒精浸泡花芽;
1-C)用次氯酸钠溶液对花芽进行表面灭菌,用无菌水冲洗;
1-D)吸干花芽表面水分后从花序取出花药,即得。
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