[发明专利]一种粒径可控的载药纳米脂质体的制备方法

说明书

技术领域

本发明是一种载药纳米脂质体的制备方法，具体涉及一种粒径可控的载药纳米脂质体的制备方法，。

背景技术

2.1 纳米脂质体

纳米脂质体是磷脂双分子层结构，它具有一些类似生物膜的特性，例如：极好的亲水性、亲脂性和天然的靶向性、长效性、包容性等，并且纳米脂质体都是无毒、无免疫原性的，它们吸收速度快、生物利用度高、给药方便。

脂质体的效用与其粒径呈反相关的关系，一般说来，脂质体粒径越小，其具有的表面效应和小尺寸效应所达到的效果则越大，即脂质体所载的药物能够对其他药物难以到达的部位起到很好的补充治疗作用，并且有更多的处于表面的活性物质原子能够参与功效反应，因此，制备粒径小且分布均一的脂质体已经成为目前脂质体研究中的重要方向。

近年来，人们对脂质体的制备方法进行了大量的探索，主要有：逆向蒸发法、注入法、二次乳化法、冷冻熔融法、薄膜分散法、表面活性剂处理法、超临界CO₂流体技术、主动载药法、薄膜接触器法、微通道法、纳米反应器法等，但这些方法都具有粒径不可控制、约束效果不明显、操作过于复杂等不足，例如，逆向蒸发法，此法制得的脂质体粒径较大，不易达到纳米级，冷冻熔融法，过于复杂，且过程需要对脂质体进行冷冻和复融以完成制备，其精密度很高，不易操作，并且制得的脂质体粒径也不能进行控制。

2.2 凝胶

交联葡聚糖凝胶(Sephadex)是一种由高分子化合物葡聚糖和环氧氯丙烷相互交联的立体网状结构物，葡聚糖-琼脂糖复合凝胶(Superdex)是一种用葡聚糖以共价方式交联到琼脂糖上的复合凝胶，凝胶均能吸水，吸水后体积泡涨，这是由于它分子中具有许多亲水基团，吸水后使它的网孔张开，这些网孔能把水溶液中不同大小分子量的溶质区分筛开，因而起到“分子筛”的功能。

发明内容

本发明针对脂质体制备方法存在的问题以及在对凝胶特性深入研究的基础上，提出了一种新的控制脂质体粒径的方法，得到一系列从百纳米级到十纳米级的载药脂质体，利用凝胶网孔的孔径约束使脂质体的制备真正达到粒径可控。

本发明中凝胶不是用于分离，而是利用其内部狭窄的空间，在制备过程中对纳米脂质体的粒径加以限制，根据脂质体成品的功能及其需求有目的的对纳米脂质体的粒径进行可控调节。

本发明采用如下技术方案：

粒径可控的载药纳米脂质体的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)对凝胶进行前处理：称取3-5g凝胶，加入30-50mL蒸馏水，沸水浴中溶胀1-2小时，倾去上清液及细颗粒，并蒸馏水清洗2-4遍备用；

(2)去离子水中加入3-5ml处理好的凝胶，并加入0.8-1g冻干保护剂，700-750r/min搅拌加热至70-74℃构成水相，控制水与凝胶体积比为＝3.5-4∶1；凝胶的体积与冻干保护剂质量的比为4-5∶1；

(3)将脂类和药物加入到13-18ml溶剂中，超声加热处理，超声频率为70％-80％，加热温度50-55℃，处理时间2-3小时，使其充分溶解，构成有机相；

(4)用玻璃注射器缓慢将有机相注入水相中，控制有机相与水相的体积比为2∶2.8-3.2，搅拌蒸发至溶液体系8-10mL；

(5)搅拌完成后向步骤(4)溶液体系中加入冰水并至于室温下，继续搅拌10-15min；

(6)将处理过的脂质体通过微孔滤膜进行真空抽滤，得到纳米脂质体纯品；

(7)将脂质体纯品在-15℃--20℃下预冻3-4小时，接着在-40℃--50℃下真空冷冻干燥大于24小时，即得脂质体干粉剂成品。

所述的粒径可控的载药纳米脂质体的制备方法，其特征在于：所述的冻干保护剂选自海藻糖或者甘露醇。

所述的粒径可控的载药纳米脂质体的制备方法，其特征在于：所述的步骤(2)中凝胶选自交联葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶、交联葡聚糖-琼脂糖复合凝胶、聚丙烯酰胺凝胶和聚苯乙烯凝胶。

所述的粒径可控的载药纳米脂质体的制备方法，其特征在于：所述的步骤(3)中药物选自任意的水溶或脂溶性药物，所述的脂类选自12个碳链以上的脂肪酸甘油酯、脂肪酸、Compritol ATO 888中的一种或几种混合物。

所述的粒径可控的载药纳米脂质体的制备方法，其特征在于：所述的步骤(3)中溶剂为乙醇或乙醚。

本发明的优点：

(1)达到了纳米脂质体粒径制备可控的目的，在纳米脂质体制备的过程中可以根据需求加入不同型号的凝胶制备出不同粒径大小的纳米脂质体，此方法效率高，制备过程简单方便，可重复性高。