[发明专利]一种体外检测日本血吸虫尾蚴对吡喹酮抗药性的方法无效
申请号: | 201110441335.3 | 申请日: | 2011-12-26 |
公开(公告)号: | CN102520149A | 公开(公告)日: | 2012-06-27 |
发明(设计)人: | 李洪军;梁幼生;汪伟;曲国立;邢云天;戴建荣 | 申请(专利权)人: | 江苏省血吸虫病防治研究所 |
主分类号: | G01N33/50 | 分类号: | G01N33/50 |
代理公司: | 无锡市大为专利商标事务所 32104 | 代理人: | 时旭丹;刘品超 |
地址: | 214064 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 体外 检测 日本 血吸虫 尾蚴 吡喹酮 抗药性 方法 | ||
1.一种体外检测日本血吸虫尾蚴对吡喹酮抗药性的方法,其特征在于取一块24孔细胞培养板,在板孔内加入浓度分别为10-5、5×10-6、10-6及5×10-7 mol/L吡喹酮药液1 mL,随后用接种环移入20~50条新逸出的日本血吸虫尾蚴,在吡喹酮药液作用20 min后在解剖镜下观察各孔内尾蚴断尾变化,计算尾蚴断尾率,实验重复6次,通过观察尾蚴断尾率,检测日本血吸虫尾蚴对吡喹酮的抗药性。
2.根据权利权求1所述的体外检测日本血吸虫尾蚴对吡喹酮抗药性的方法,其特征在于尾蚴断尾变化,是指在吡喹酮药液作用后,日本血吸虫尾蚴的体部和尾部分离断开。
3.根据权利权求1所述的体外检测日本血吸虫尾蚴对吡喹酮抗药性的方法,其特征在于吡喹酮药液为吡喹酮溶于1%二甲基亚砜DMSO中配制成浓度为1×10-3 mol/L与水稀释备用。
4.根据权利要求1、2或3所述的体外检测日本血吸虫尾蚴对吡喹酮抗药性的方法,其特征在于先在24孔细胞培养板孔内加入浓度分别为10-5、5×10-6、10-6及5×10-7 mol/L吡喹酮药液各1mL,然后用接种环移入20~50条新逸出的日本血吸虫尾蚴,在吡喹酮药液作用20 min后,在解剖镜下观察各孔内尾蚴断尾变化,计算尾蚴断尾率,实验重复6次,在经10-5 mol/L吡喹酮药液作用20 min后,尾蚴断尾率< 40%;经5×10-6 mol/L吡喹酮药液作用20 min后,尾蚴断尾率< 35%;经10-6 mol/L吡喹酮药液作用20 min后,尾蚴断尾率< 30%;经5×10-7 mol/L吡喹酮药液作用20 min后,尾蚴断尾率< 10%,即认为该日本血吸虫尾蚴对吡喹酮具有抗药性。
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