[发明专利]一种创伤弧菌PCR检测试剂盒及检测方法有效
| 申请号： | 201110444136.8 | 申请日： | 2011-12-27 |
| 公开（公告）号： | CN102653786A | 公开（公告）日： | 2012-09-05 |
| 发明（设计）人： | 胡健饶;吴雁;顾辉清;陈雪君;章丽梅 | 申请（专利权）人： | 杭州师范大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/63 |
| 代理公司： | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人： | 黄美娟;冷红梅 |
| 地址： | 310036 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 创伤 弧菌 pcr 检测 试剂盒 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种创伤弧菌PCR检测试剂盒，主要包括PCR特异性扩增引物、DNA聚合酶、脱氧三磷酸核苷混合物和PCR缓冲液，其特征在于：所述特异性扩增引物如下：
v-toxR(+)：5′-TGATTCCAGCCTAACTCAAG-3′
vv-toxR(-)：5′-TTTGAACCGCGTCAGTACTG-3′。
2.一种利用权利要求1所述试剂盒检测样品中创伤弧菌的方法，所述方法包括：
(1)提取待测样品DNA；
(2)以待测样品DNA为模板，加入特异性扩增引物、DNA聚合酶、脱氧三磷酸核苷混合物和PCR缓冲液配制PCR反应液，进行PCR扩增；所述特异性扩增引物如下：
v-toxR(+)：5′-TGATTCCAGCCTAACTCAAG-3′
vv-toxR(-)：5′-TTTGAACCGCGTCAGTACTG-3′；
(3)扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，若电泳结果出现230bp特异性条带，则判断为阳性，否则为阴性。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于所述PCR扩增条件如下：94℃5min一个循环；94℃30s，60℃30s，72℃30s，30个循环；72℃延伸反应7min。
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