[发明专利]一种微量磷酸化多肽除盐小柱

权利要求书

1.一种微量磷酸化多肽除盐小柱，其特征在于：该小柱利用反相C18与聚吡咯复合物做分离材料，采用下述方法制成，制备包括以下步骤：

1)、称取0.01克石英棉于离心管，加入1毫升去离子水和25微升吡咯，超声10分钟；

2)、将100微升浓度为20微克/微升过硫酸铵水溶液快速加入步骤1)所得的混合物中，涡流使其快速混匀，再超声10分钟；

3)、取步骤2)得到聚吡咯修饰石英棉用乙醇清洗，并保存于乙醇溶液中；

4)、将保存在乙醇溶液中的聚吡咯修饰石英棉装填于含C18反相分离材料的微量ZipTip_C18移液管，用移液器将之填紧；

5)、密封微量移液管上端即得。

2.权利要求1所述的微量磷酸化多肽除盐小柱的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1)、称取0.01克石英棉于离心管，加入1毫升去离子水和25微升吡咯，超声10分钟；

2)、将100微升浓度20微克/微升的过硫酸铵水溶液快速加入步骤1)所得的混合物中，涡流使其快速混匀，再超声10分钟；

3)、取步骤2)得到聚吡咯修饰石英棉用乙醇清洗，并保存于乙醇溶液中；

4)、将步骤3)保存在乙醇溶液中的聚吡咯修饰石英棉装填于含C 18反相分离材料的微量ZipTip_C18移液管上部，用移液器将之填紧；

5)、密封微量移液管上端即得。

3.权利要求1所述的微量磷酸化多肽除盐小柱的应用，其特征在于，应用于胰蛋白酶解液质谱分析，其做法是，将微量磷酸化多肽除盐小柱依次用含0.1wt％TFA的80wt％乙腈溶液、0.1wt％TFA水溶液清洗各三次；pH为8的胰蛋白酶解液先用0.1wt％TFA调至酸性，使pH 2～3，或直接上样；然后用0.1wt％TFA水溶液清洗两次，最后用含0.1wt％TFA的50wt％乙腈溶液洗脱，洗脱液用于质谱分析。