[发明专利]一种蓖麻碱的水提方法及提取物的应用以及蓖麻碱的毒性评价方法

说明书

技术领域

本发明属于蓖麻碱提取技术领域，尤其是一种蓖麻碱的水提方法及提取物的应用以及蓖麻碱的毒性评价方法。

背景技术

玉米象，Sitophilus zeamais(Motschusky)，属鞘翅目象甲科，是我国储粮主要害虫之一，也是世界性的重要储粮害虫。它寄生于多种食物中，以玉米、小麦、高粱受灾最重。主要危害贮存2-3年的陈粮，成虫啃食谷粒，幼虫蛀蚀谷粒。目前主要防治方法是利用马拉硫磷诱杀成虫。已经证明，茴香、八角、黑胡椒粉、红桔油、薄荷脑、樟脑、桉叶油、除虫菊等植物性提取物对储粮害虫有不同程度的防治效果。

赤拟谷盗Tribolium castaneum(Herbst)，属鞘翅目拟步甲科，别名拟谷盗。主要危害面粉，使面粉产生霉腥味，其分泌物还含有致癌物--苯醌。主要防治方法为冷冻杀虫、高温杀虫、磷化铝熏蒸法等。随着可持续植保理论的提出，储粮害虫的治理方法也面临着新挑战，植物性杀虫剂的研究与开发成为研究热点之一。

在农业领域，我国大部分地区一直沿用化学合成剧毒农药进行防治，是农、林、牧业生产中杀虫、灭菌的主导产品。化学合成剧毒农药在粮食、瓜果、蔬菜及牧草表面的残留量多、滞留时间长、不易分解，给人、畜、禽的健康造成了严重的危害。同时，因防治对象中化学合成农药等有害成分残留量高，给我国的对外贸易造成了巨大损失，并且，化学合成农药毒性大，害虫易产生抗性。

植物源农药具有对人畜毒性低、在环境中易降解、少残留或无残留等特点，因此，从植物中提取分离有杀虫活性物质，已成为近年来国内外植物保护工作者研究开发的热点。研究发现，蓖麻毒素粗提物对天幕毛虫、桃蚜、小菜蛾等虫有不同程度的杀灭作用，其中对小菜蛾化蛹有较强的抑制作用，化蛹率低于30％。蓖麻碱则表现为胃毒作用，并具有一定拒食效果。蓖麻碱与Bt结合对甜菜夜蛾也有明显的防治作用。综上所述，蓖麻碱在储粮害虫防治方面的应用前景广阔。

秀丽小杆线虫Caenorhabditis elegans是一种国际公认的模式生物，为多细胞生物。其结构简单、遗传背景清楚，生活周期短，可在实验室大量培养，与其他模型生物相比可以避免个体差异造成的误差，有利于生物毒性评价的标准化与规范化，可用于毒理学研究和毒性评价体系。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种蓖麻碱的水提方法及提取物的应用以及蓖麻碱的毒性评价方法，本发明利用磁力搅拌提取技术，以水作为提取溶剂，从蓖麻籽壳和蓖麻老叶中提取高纯度蓖麻碱，利用蓖麻碱防治储粮害虫玉米象和赤拟谷盗，并利用秀丽隐杆线虫对蓖麻碱进行毒性评价，测定线虫致死率、生殖能力、体长和体内酶的活性。

本发明实现目的技术方案如下：

1.一种蓖麻碱的水提方法，其特征在于：步骤如下：

(1)将蓖麻籽壳∶蓖麻老叶＝5∶1m/m的比例进行混合，按水∶粉碎料＝10∶1加水；

(2)将混合粉碎料在60℃恒温水浴，磁力搅拌，回流提取4h；

(3)用超声波技术再次对上述混合料液进一步提取，过滤，回收提取液；

(4)放入50℃干燥箱内进行干燥；

(5)干燥所得固体加入100mL蒸馏水，加热溶解并用1％的盐酸调pH为2-3，过滤，溶液用1％氨水调pH为9，过滤，溶液50℃进行真空干燥，得蓖麻碱。

一种由蓖麻碱的水提方法制备的蓖麻碱水提物，步骤如下：

(1)将蓖麻籽壳∶蓖麻老叶＝5∶1m/m的比例进行混合，按水∶粉碎料＝10∶1加水；

(2)将混合粉碎料在60℃恒温水浴，磁力搅拌，回流提取4h；

(3)用超声波技术再次提取蓖麻碱对上述混合料液进一步提取，过滤，回收提取液；

(4)合并步骤(2)和(3)的滤液。

一种蓖麻碱的毒性评价方法，包括如下步骤：

(1)蓖麻碱对储粮害虫的趋避效果测定。采用药膜选择法；

(2)蓖麻碱对储粮害虫熏蒸效果测定，采用广口瓶密闭熏蒸法；

(3)线虫对蓖麻碱水提物的毒性评价，蓖麻碱对秀丽线虫的致死率试验；

(4)蓖麻碱对线虫生殖能力影响的试验；

(5)蓖麻碱对线虫体长影响的试验；

(6)蓖麻碱对线虫体内酶活力的影响的试验。