[发明专利]Aspochalasin U及其制备方法和应用

权利要求书

1.Aspochalasin U，其特征在于其分离自曲霉F00685 Aspergillus sp.F00685在PDA培养基上的代谢产物，所述曲霉F00685 Aspergillus sp.F00685已于2011年5月19日保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏中心保藏编号为CCTCC NO：M2011179；

所述Aspochalasin U的结构为：(3S，3aR，6S，6aR，12R，13R，151R，E)-6，12，13-trihydroxy-3-isobutyl-4，5，8-trimethyl-3，3a，6，6a，9，10，11，12，13，14-decahydro-1H-cycloundeca[d]isoindole-1，15(2H)-dione，其结构式如下：

所述Aspochalasin U的分子式为C₂₄H₃₇NO₅，分子量为419。

2.如权利要求1所述的Aspochalasin U的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1)将曲霉F00685 Aspergillus sp.F00685发酵；

2)划线接种于半海水PDA平板上，培养活化，待菌落长出后重新接种到新鲜的半海水PDA平板上，待菌落布满整个平板且产孢后作为种子板；

3)将种子平板划成3mm×3mm的小块，以挑块的方式接种半海水固体PDA发酵平板后培养，即得Aspochalasin U。

3.如权利要求2所述的Aspochalasin U的制备方法，其特征在于在步骤1)中，所述发酵采用葡萄糖-土豆-琼脂培养基，所述葡萄糖-土豆-琼脂培养基的配方为葡萄糖20g，土豆200g，琼脂15g，半海水定容至1L。

4.如权利要求2所述的Aspochalasin U的制备方法，其特征在于在步骤2)中，所述培养活化的温度为28℃。

5.如权利要求2所述的Aspochalasin U的制备方法，其特征在于在步骤3)中，所述培养的条件置于28℃培养箱培养14天。

6.如权利要求1所述的Aspochalasin U的分离纯化方法，其特征在于包括以下步骤：

1)将权利要求2步骤3)所获得的培养物切成边长为0.5cm小块后，用乙酸乙酯、甲醇和冰醋酸混合溶液浸提，所述乙酸乙酯、甲醇和冰醋酸按体积比为乙酸乙酯∶甲醇∶冰醋酸＝80∶15∶5；所述浸提可浸提3～4次，再将滤液减压浓缩至干，得提取物浸膏；

2)将提取物浸膏用乙酸乙酯水溶液萃取至水相无色，所述乙酸乙酯∶水的体积比为1∶1，所述减压浓缩采用旋转蒸发仪42℃减压浓缩至干，然后再用甲醇和石油醚萃取，所述甲醇∶石油醚的体积比为1∶1，甲醇相减压浓缩至干得发酵提取物；

3)将发酵提取物用甲醇溶解后经中压液相反相硅胶柱层析，分别用纯水、30％甲醇-水、50％甲醇-水、70％甲醇-水、100％甲醇-水系统洗脱，其中50％甲醇洗脱的组分按每200mL/管收集，根据薄层层析(TLC)检测的结果合并含有Aspochalasin U的组分并浓缩至干；

4)含Aspochalasin U组分再经分子筛凝胶柱层析，甲醇洗脱，流速15s/滴，3600s/管进行收集，经TLC检测合并含有Aspochalasin U的组分；目标化合物组分再次经凝胶柱层析，丙酮洗脱，可得到Aspochalasin U纯品。

7.如权利要求1所述Aspochalasin U在制备抗炎症药物或具有其他生物活性的先导物中的应用。