[发明专利]一种基于海洋青鳉卵黄蛋白原的水体雌激素污染检测方法无效
| 申请号： | 201110452160.6 | 申请日： | 2011-12-30 |
| 公开（公告）号： | CN103184276A | 公开（公告）日： | 2013-07-03 |
| 发明（设计）人： | 黄乾生;方超;伍辛泷;董四君 | 申请（专利权）人： | 中国科学院城市环境研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 361021 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 海洋 卵黄蛋白 水体 雌激素 污染 检测 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种用于检测海水环境雌激素污染的新技术，其特征在于它是以新型海水模式鱼种—海洋青鳉鱼雄鱼（Oryzias melastigma）为受试对象，以暴露后的生物学效应来评估环境雌激素的污染程度。
2.根据权利要求1所述的检测技术，其特征在于根据卵黄蛋白原（VTG1）和18S编码基因序列，设计VTG1荧光定量PCR引物（序列为：F: 5’-TTGGCAGAGATGCAGCAGCGGT-3’；R: 5’-GGAAATGCAGGACACCCCAGTAGCC-3’）和内参基因18S荧光定量PCR引物（序列为：5’-AACGCTGTGCTGCGTAGCCTCAATT-3’；R: 5’-AGAAGAAGCCCCACTTTTCCTCGCA-3’）。
3.根据权利要求1所述的检测技术，其特征在于建立相对定量PCR法，分析环境样品诱导鱼VTG1表达水平的差异。
4.根据权利要求3所述的检测技术，其特征在于对海洋青鳉鱼进行环境样品暴露，以8小时为暴露时长，并设立阴性和阳性对照，阴性对照为洁净人工海水暴露，阳性对照为100ng/L 17-beta-雌二醇（E2）暴露，该体系用于评估样品的环境雌激素污染程度。
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