[发明专利]一种高灵敏量子点免疫渗滤荧光定量检测方法有效
申请号: | 201110452812.6 | 申请日: | 2011-12-29 |
公开(公告)号: | CN102539771A | 公开(公告)日: | 2012-07-04 |
发明(设计)人: | 王东 | 申请(专利权)人: | 北京康美天鸿生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577;G01N33/558;G01N21/64 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 冯琼;李玉秋 |
地址: | 102308 北京市门*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 灵敏 量子 免疫 渗滤 荧光 定量 检测 方法 | ||
1.一种高灵敏量子点免疫渗滤荧光定量检测的方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1)合成荧光发射波长范围为550~1300nm的量子点纳米颗粒;
步骤2)用化学交联或生物分子间特异性作用将配体和质控分子连接到量子点表面,得到配体修饰的量子点和质控分子修饰的量子点,混合均匀后得到量子点标记液;
步骤3)将弱荧光渗滤膜、极弱荧光吸水垫和极弱荧光扣卡按常规方法组装成免疫渗滤装置,在渗滤膜上设定质控点和定量点;
步骤4)滴加样本和量子点标记液进行免疫渗滤后,加缓冲液洗涤,检测定量点和质控点荧光信号强度,并以质控点荧光信号强度校正定量点荧光信号强度,进而实现被测物的定量检测。
2.如权利要求1所述的高灵敏量子点免疫渗滤荧光定量检测的方法,其特征在于,步骤1)所述量子点为单一化合物形成的量子点或是几种化合物组装成的复合物量子点。
3.如权利要求2所述的高灵敏量子点免疫渗滤荧光定量检测的方法,其特征在于,所述化合物是从ZnS、CdS、HgS、MgS、CdSe、MgSe、ZnSe、PbSe、PbSe、CdTe、MgTe、ZnTe、HgTe、InAs、InP组成的组中选择,且可掺杂Cu、Mn和Hg。
4.如权利要求1所述的高灵敏量子点免疫渗滤荧光定量检测的方法,其特征在于,步骤2)所述配体包含抗原、半抗原、多克隆抗体、单克隆抗体和激素受体。
5.如权利要求1所述的高灵敏量子点免疫渗滤荧光定量检测的方法,其特征在于,步骤2)所述配体修饰的量子点的荧光发射波长为800nm,质控分子修饰的量子点的荧光发射波长为700nm。
6.如权利要求1所述的高灵敏量子点免疫渗滤荧光定量检测的方法,其特征在于,步骤2)配体修饰的量子点与质控分子修饰的量子点的荧光发射波长均为630nm。
7.如权利要求1所述的高灵敏量子点免疫渗滤荧光定量检测的方法,其特征在于,步骤3)所述弱荧光渗滤膜在大于550nm时荧光很弱或不含荧光剂。
8.如权利要求1所述的高灵敏量子点免疫渗滤荧光定量检测的方法,其特征在于,步骤3)所述渗滤膜包含至少一个用于竞争或捕获被测物的定量点,至少一个用于捕获质控分子的质控点,且以加样孔中心为圆心,定量点和质控点处同心圆上。
9.如权利要求1所述的高灵敏量子点免疫渗滤荧光定量检测的方法,其特征在于,步骤3)所述极弱荧光吸水垫和极弱荧光扣卡均为未加荧光剂。
10.如权利要求1所述的高灵敏量子点免疫渗滤荧光定量检测的方法,其特征在于,步骤3)所述免疫渗滤装置用于定量样本中的至少一种被测物。
11.如权利要求10所述的高灵敏量子点免疫渗滤荧光定量检测的方法,其特征在于,所述被测物包括小分子、抗原、抗体、激素、抗生素、细菌或病毒及其他生化标志物。
12.如权利要求11所述的高灵敏量子点免疫渗滤荧光定量检测的方法,其特征在于,所述小分子包含药物或毒品。
13.如权利要求11所述的高灵敏量子点免疫渗滤荧光定量检测的方法,其特征在于,所述其他生化标志物包括心血管标志物、肿瘤标志物或自身免疫性疾病标志物。
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