[发明专利]一种检测抗线粒体抗体M2型的试剂装置及其方法

权利要求书

1.一种检测抗线粒体抗体M2型的试剂装置，其特征在于：所述的试剂装置为长条状，包括具有八个孔位的基体和位于基体一端的手柄，八个孔位的排列顺序从近手柄端开始依次为样本孔、辅剂孔、酶结合物孔、底物孔、终止液孔、稀释液孔、反应孔和稀释孔，样本孔内盛有待测样本，辅剂孔供检测有需要时加入辅助试剂使用，酶结合物孔内盛有酶结合物溶液，底物孔内盛有底物溶液，终止液孔内盛有终止液，稀释液孔内盛有稀释液，反应孔为平底且具有高的光通透性，孔内包被有丙酮酸脱氢酶复合物或2-氧酸脱氢酶复合体抗原，并作为反应容器加注待测的液体样本和检测试剂及洗涤液，反应终止后进行吸光度测定，稀释孔作为样本稀释容器，供稀释样本时用。

2.根据权利要求1所述的试剂装置，其特征在于：所述的试剂装置中，辅剂孔、酶结合物孔、底物孔、终止液孔和稀释液孔上覆盖有密封薄膜。

3.根据权利要求1或2所述的试剂装置，其特征在于：所述的手柄上粘贴有条形码，该条形码标识有抗线粒体抗体M2型检测试剂及分析装置的相关信息。

4.根据权利要求3所述的试剂装置，其特征在于：所述的信息包括检测项目代码、检测试剂生产批号、试剂有效期、定量检测标准曲线参数、酶联免疫反应类型、试剂及分析装置的序列号等。

5.根据权利要求1或2所述的试剂装置，其特征在于：所述试剂装置还包括若干个支撑柱，所述的支撑柱位于所述试剂装置中基体的下面，相邻支撑柱之间间隔有一个以上的孔位。

6.根据权利要求1或2所述的试剂装置，其特征在于：所述试剂装置中反应孔由外孔和内孔构成，外孔的底部开有底孔，内孔穿过底孔且与底孔紧配合，外孔和内孔之间留有防溢腔。

7.根据权利要求6所述的试剂装置，其特征在于：所述试剂装置中反应孔的内孔包被的抗原包括丙酮酸脱氢酶复合物或2-氧酸脱氢酶复合体。

8.一种利用权利要求1-7所述的试剂装置进行抗线粒体抗体M2型检测的方法，其特征在于，所述的方法包括如下的步骤：

1)在所述的样本孔中加入未稀释的样本；

2)从稀释液孔中吸取稀释液加入稀释孔中；

3)移除稀释液孔中的剩余液体，从稀释孔中吸取部分液体回稀释液孔；

4)从样本孔中吸取样本加入稀释液孔中，将样本进行稀释；

5)从稀释液孔中吸取液体加入稀释孔中，将样本进行进一步的稀释；

6)从稀释孔中吸取液体加入反应孔中，25～37℃的条件下，孵育30～60min；

7)用洗涤液对反应孔进行3～5次洗涤后移除液体；

8)从酶结合物孔中吸取酶结合物溶液加入反应孔中，25～37℃的条件下，反应30～60min后移除液体；

9)重复步骤7)；

10)从底物孔中吸取底物溶液加入反应孔中，25～37℃的条件下，反应10～20min；

11)从终止液孔中吸取终止液加入反应孔中，1～10min内于450nm读取OD值，或选择双波长法测定，波长范围在620nm～690nm。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述的方法包括如下的步骤：

1)在所述的样本孔中加入未稀释的样本，体积至少为样本孔容量的1/4；

2)从稀释液孔中吸取稀释液加入稀释孔中，吸取的量为孔内液体总量的7/10以上；

3)移除稀释液孔中的剩余液体，根据预期稀释倍数从稀释孔中吸取部分液体回稀释液孔；

4)从样本孔中吸取样本加入稀释液孔中，将样本进行稀释，稀释倍数为1～10倍；

5)从稀释液孔中吸取液体加入稀释孔中，将样本进行进一步的稀释，稀释倍数为1～100倍；

6)从稀释孔中吸取液体加入反应孔中，25～37℃的条件下，孵育30～60min；

7)用洗涤液对反应孔进行3～5次洗涤后移除液体；

8)从酶结合物孔中吸取酶结合物溶液加入反应孔中，25～37℃的条件下，反应30～60min后移除液体；

9)重复步骤7)；

10)从底物孔中吸取底物溶液加入反应孔中，25～37℃的条件下，反应10～20min；

11)从终止液孔中吸取终止液加入反应孔中，1～10min内于450nm读取OD值，或选择双波长法测定，波长范围在620nm～690nm。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述的方法包括如下的步骤：

1)在所述的样本孔中加入样本80～150μL；

2)用精密加液器从稀释液孔中吸取360μL液体到稀释孔中；

3)移除稀释液孔中的剩余液体，从稀释孔中吸取180μL液体回稀释液孔；

4)用精密加液器从样本孔中吸取20μL液体到稀释液孔中，样本10倍稀释；

5)用精密加液器从稀释液孔中吸取液体20μL到稀释孔中，样本100倍稀释；

6)用精密加液器从稀释液孔中吸取液体100μL到反应孔中，25～37℃下，孵育60min后移除液体；

7)用洗涤液对反应孔进行3～5次洗涤后移除液体；

8)用精密加液器从酶结合物孔中吸取100μL辣根过氧化物酶标记的抗体酶结合物溶液至反应孔进行反应，25～37℃下，反应30min后移除液体；

9)重复步骤7)；

10)用精密加液器从底物孔中吸取100μL的TMB底物溶液至反应孔中反应10～15min；

11)用精密加液器从终止液孔中吸取100μL的终止液加注至反应孔中，1～10min内于450nm和630nm双波长条件下进行检测，读取OD值。