[发明专利]检测非对称二甲基精氨酸含量的胶乳增强免疫比浊法试剂盒

权利要求书

1.一种测定非对称二甲基精氨酸含量的胶乳增强免疫比浊法试剂盒，其特征在于，包括：

1)非对称二甲基精氨酸R1试剂；

2)非对称二甲基精氨酸R2试剂；

3)非对称二甲基精氨酸校准品；

所述非对称二甲基精氨酸R1试剂包括非对称二甲基精氨酸特异性单克隆抗体、缓冲液、稳定剂、促凝剂和防腐剂；

所述非对称二甲基精氨酸R2试剂包括非对称二甲基精氨酸-惰性蛋白复合体包被的胶乳颗粒、缓冲液、稳定剂和防腐剂；

所述非对称二甲基精氨酸校准品是由非对称二甲基精氨酸、缓冲液、稳定剂和防腐剂组成。

2.根据权利要求1所述的测定非对称二甲基精氨酸含量的胶乳增强免疫比浊法试剂盒，其特征在于，所述非对称二甲基精氨酸-惰性蛋白复合体是通过偶联剂将非对称二甲基精氨酸和惰性蛋白偶联后而获得。

3.根据权利要求1或2所述的测定非对称二甲基精氨酸含量的胶乳增强免疫比浊法试剂盒，其特征在于，所述的惰性蛋白选白人血清白蛋白、牛血清白蛋白、牛转铁蛋白和血蓝蛋白中的一种。

4.根据权利要求1至3任一项所述的测定非对称二甲基精氨酸含量的胶乳增强免疫比浊法试剂盒，其特征在于，所述胶乳颗粒是一种核壳结构，乳核是聚苯乙烯聚合物，乳壳由苯乙烯、丙烯酸正丁酯和甲基丙烯酸共聚物组成。

5.根据权利要求1至4任一项所述的测定非对称二甲基精氨酸含量的胶乳增强免疫比浊法试剂盒，其特征在于，所述胶乳颗粒直径范围为50-250nm，使用浓度选自0.05-0.5％。

6.根据权利要求1至5任一项所述的测定非对称二甲基精氨酸含量的胶乳增强免疫比浊法试剂盒，其特征在于，所述非对称二甲基精氨酸-惰性蛋白复合体可以通过与胶乳颗粒本身携带的化学基团通过化学键结合在胶乳颗粒表面，常用的化学基团包括羧基、氨基、羟基、酰肼基、氯甲基等，本发明通过优化的化学交联方法将非对称二甲基精氨酸-惰性蛋白复合特异性的结合在胶乳颗粒表面的羧基上，所述优化的化学交联方法概括为“一步双pH”法。

7.根据权利要求1至6任一项所述的测定非对称二甲基精氨酸含量的胶乳增强免疫比浊法试剂盒，其特征在于，所述缓冲液选自3-[N，N-二(羟乙基)氨基]-2-羟基丙磺酸-氢氧化钠缓冲液、4-(2-羟乙基)-1-哌嗪丙磺酸-氢氧化钠缓冲液、三羟甲基氨基甲烷-HCl缓冲液、磷酸盐缓冲液、甘氨酸缓冲液和巴比妥缓冲液中的一种或两种以上，使用浓度选自10-200mM。

8.根据权利要求1至7任一项所述的测定非对称二甲基精氨酸含量的胶乳增强免疫比浊法试剂盒，其特征在于，所述稳定剂选自0.1-5％浓度范围的牛血清白蛋白、0.5-1％浓度范围的氯化钠、2-50mM的EDTA、0.1-1％浓度范围的吐温-20和1-10％浓度范围的丙三醇一种或两种以上。

9.根据权利要求1至8任一项所述的测定非对称二甲基精氨酸含量的胶乳增强免疫比浊法试剂盒，其特征在于，所述防腐剂选自叠氮钠、硫柳汞、苯酚和乙基汞硫代硫酸钠中的一种或两种以上，使用浓度选自0.02％-0.1％。

10.根据权利要求1至9任一项所述的测定非对称二甲基精氨酸含量的胶乳增强免疫比浊法试剂盒，其特征在于，所述促凝剂选自PEG-4000、PEG-6000、PEG-g000和硫酸葡聚糖钠中的一种，使用浓度范围选自1-6％。

11.根据权利要求1至10任一项所述的测定非对称二甲基精氨酸含量的胶乳增强免疫比浊法试剂盒，其特征在于其由如下组分组成：

R1：0.2mg/mL ADMA单克隆抗体、0.9％氯化钠、5％PEG-6000、0.2％BSA、20mM EDTA、0.1％叠氮化钠、50mM Tris-HCl缓冲液pH7.2；

R2：非对称二甲基精氨酸-人血清白蛋白复合体包被的聚苯乙烯胶乳颗粒0.25％、50mM的甘氨酸缓冲液pH8.0、0.9％氯化钠、0.8％BSA、20mM EDTA、0.1％吐温20、0.1％叠氮化钠，其中所述聚苯乙烯胶乳颗粒表面带有羧基、直径为150nm；

非对称二甲基精氨酸校准品：浓度分别为0、0.5、2、5、10、20umol/L的非对称二甲基精氨酸、0.9％氯化钠、1％BSA、50mM EDTA、0.1％叠氮化钠、50mM Tris-HCl缓冲液pH7.2。