[发明专利]一种提取高纯度微囊藻毒素的方法无效
| 申请号： | 201110455131.5 | 申请日： | 2011-12-30 |
| 公开（公告）号： | CN102516367A | 公开（公告）日： | 2012-06-27 |
| 发明（设计）人： | 母锐敏;袁学良;石敬华;韩雪梅 | 申请（专利权）人： | 山东建筑大学 |
| 主分类号： | C07K7/56 | 分类号： | C07K7/56;C07K1/14 |
| 代理公司： | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人： | 王立晓 |
| 地址： | 250101 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 提取 纯度 微囊藻 毒素 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种提取高纯度微囊藻毒素的方法，其特征是，包括步骤如下：
(1)水样预处理：将铜绿微囊藻水样经液氮反复冻融2-4次，以破碎藻细胞，释放胞内微囊藻毒素MC-LR，然后将冻融后的水样离心取上清液备用；
(2)SPE固相萃取柱的预处理、MC-LR的富集与纯化：用甲醇清洗固相萃取柱2-4次，再用超纯水清洗2-4次；向清洗后的固相萃取柱内通入步骤(1)的上清液过柱，过柱完后用甲醇水溶液作淋洗液清洗富集了MC-LR的固相萃取柱，除去杂质；
(3)MC-LR的溶出与浓缩：用100％甲醇作为洗脱液清洗富集了MC-LR的固相萃取柱以洗脱MC-LR，使MC-LR溶出，将溶出的MC-LR-甲醇混合溶液置于旋转蒸发仪，40-60℃，旋转蒸发10-20min。
2.根据权利要求1所述的一种提取高纯度微囊藻毒素的方法，其特征是，步骤(1)中所述的离心是在8000-10000rpm速度下离心8-12分钟。
3.根据权利要求1所述的一种提取高纯度微囊藻毒素的方法，其特征是，步骤(2)中所述的固相萃取柱为C18固相萃取柱；所述的过柱速度均为5ml/min。
4.根据权利要求1所述的一种提取高纯度微囊藻毒素的方法，其特征是，步骤(2)中所述的甲醇水溶液浓度为10％-20％，洗涤1-2次。
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