[发明专利]一种细胞分离介质及细胞分离方法

权利要求书

1.一种用于单个核细胞分离的组合物，由分子量大于40kD的右旋糖酐、药学上可接受的羟乙基淀粉与泛影酸钠或泛影葡胺组成。

2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述右旋糖酐为Dextran 70或Dextran 40。

3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述羟乙基淀粉为羟乙基淀粉200/0.5或羟乙基淀粉130/0.4。

4.根据权利要求2或3所述的组合物，其特征在于，右旋糖酐、羟乙基淀粉质量比为1∶1、2∶1或3∶1。

5.根据权利要求1-4任一项所述的组合物，其特征在于，所述单个核细胞为单核细胞或淋巴细胞。

6.一种复方淋巴细胞分离介质，其特征在于，含有分子量大于40kD的右旋糖酐、药学上可接受的羟乙基淀粉与泛影酸钠或泛影葡胺，该分离介质为生理溶液，其密度在1.060g/cm³和1.090g/cm³之间，渗透压在280mOsmol/kg和310mOsmol/kg之间，pH在6和9之间，黏度为3.0-5.0cp。

7.根据权利要求6所述的复方淋巴细胞分离介质，其特征在于，含有0-6％(w/w)的右旋糖酐70、0-10％(w/w)的泛影酸钠、0-6％(w/w)的羟乙基淀粉200/0.5。

8.根据权利要求7所述的复方淋巴细胞分离介质，其特征在于，含有1-3％(w/w)的右旋糖酐70、5-10％(w/w)的泛影酸钠、1-3％(w/w)的羟乙基淀粉(200/0.5)。

9.根据权利要求6所述的复方淋巴细胞分离介质，其特征在于，还含有0-0.9％(w/w)的NaCl。

10.根据权利要求6-9任一项所述的复方淋巴细胞分离介质，其特征在于，其为无菌状态。

11.根据权利要求6-9任一项所述的复方淋巴细胞分离介质，其特征在于，其内毒素含量＜0.5EU/ml。

12.一种分离样品细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1：将0-80ml权利要求6-11任一项所述淋巴细胞分离介质加入离心管；

步骤2：再将利用抗凝剂处理过的平衡盐溶液或无血清培养基稀释后的样品铺在淋巴细胞分离介质上，在温度为4℃-30℃进行离心。

13.根据权利要求12所述的方法，其特征在于，步骤1为15ml离心管中装入3-5ml分离介质，或50ml离心管中装入20-30ml分离介质。

14.根据权利要求12所述的方法，其特征在于，步骤2所述稀释的稀释比例为1∶2-2∶1，优选为1∶1-1∶1.5。

15.根据权利要求12所述的方法，其特征在于，步骤2所述离心的温度为20-25℃，在100-800g的条件下进行离心；优选的离心条件为300-500g，离心时间为15-30min。

16.根据权利要求12所述的方法，其特征在于，所述样品选自外周血、脐带血或骨髓。