[发明专利]活菌数的测定方法及培养基

说明书

技术领域

本发明涉及一种利用培养法从含有双歧杆菌的待测菌中，仅对短双岐杆菌种的活菌数进行测定的方法，以及作为前述测定方法用的选择性培养基而有用的培养基。

本申请基于2010年3月26日在日本申请的日本特愿2010-72369号要求优先权，将其内容援引于此。

背景技术

双歧杆菌作为有用的肠内细菌的一种而众所周知，有很多关于其生理学意义的报告。例如，在肠内产生乳酸、醋酸等有机酸并抑制有害菌增殖的作用，维生素的产生、免疫力的激活等已被弄清楚。

因而，以往提出了各种双歧杆菌活菌制剂(非专利文献1)。另外，以通过摄取双歧杆菌来维持健康为目的，开发了含有双歧杆菌的各种食品，例如酸奶等发酵乳、点心、饮料、健康食品等。另外，在婴幼儿期，摄取母乳的婴幼儿双歧杆菌占优势，因而在日本以外，也正在开发含有双歧杆菌·乳酸菌的婴幼儿奶粉等。目前，在世界市场中作为主要添加于食品的双歧杆菌种可列举出长双岐杆菌种，也存在并用有短双岐杆菌种的制品(非专利文献2)。

认为对于消费者来说，从大量标示制品的信息的观点出发，将添加于制品中的有益菌的活菌数个别地表示有益的。另外，关于活菌数的标示，印度尼西亚已确立了如下法律：针对添加于制品中的有益菌，表示每一菌种的活菌数。

目前，作为从包含双歧杆菌和乳酸菌两者的制品中测定任一种菌的活菌数的方法，已经确立了使用仅生长双歧杆菌的培养基的方法、利用需氧培养仅对乳酸菌进行培养的方法。

另外，作为测定含有多种双歧杆菌或乳酸菌的制品中的双歧杆菌的菌种及其活菌数的方法，有根据将其涂抹于在BL琼脂培养基中添加有无菌脱纤维血液的培养基上，利用厌氧培养使其在培养基上生长而形成的菌落的形态(颜色、形状等)或利用革兰氏染色法得到的菌的形态等进行判定的方法(非专利文献3)。

现有技术文献

非专利文献

非专利文献1：光冈知足编著，《Research on bifidobacteria》，Japan Bifidus Foundation，1994年，第266-267页

非专利文献2：光冈知足编著，《Research on bifidobacteria》，Japan Bifidus Foundation，1994年，第282-283页

非专利文献3：《Method for the enumeration of bifidobacteria in fermented milk and fermented milk drinks》，the Bifidobacterium Testing Methods Review Committee of the Japanese Association of Fermented Milks and Fermented Milk Drinks，2000年3月，第1-13页

发明内容

发明要解决的问题

但是，对于如上述非专利文献3所记载的方法，当菌落的形态、菌的形状近似时，对菌种的辨别需要专业的知识。因而，各个菌种的活菌数的测定有时非常困难。另外，在日本国外，很多国家无法获得无菌脱纤维血液。对于这样的国家而言，无法制作带有血液的BL琼脂培养基，从而无法进行前述方法。

目前，由于如上述那样存在配合有短双岐杆菌种和长双岐杆菌种的制品，在世界益生菌市场中广泛使用短双岐杆菌种、长双岐杆菌种、乳双岐杆菌种等，因而寻求能够利用培养法从这些多个双岐杆菌种混合存在的制品中，仅对特定的菌种、例如仅对短双岐杆菌种进行容易地测定的技术。

本发明是为了解决上述课题而进行的，其目的在于提供一种通过使用特定的培养法，从含有双歧杆菌的待测菌中仅对短双岐杆菌种的活菌数进行容易地测定的测定方法，以及作为前述测定方法用的选择性培养基而有用的、且调制也容易的培养基。

用于解决问题的方案