[发明专利]通过电穿孔技术进行的外源基因转移方法有效
申请号: | 201180006731.1 | 申请日: | 2011-01-12 |
公开(公告)号: | CN102725404A | 公开(公告)日: | 2012-10-10 |
发明(设计)人: | 早川靖彦;早川清 | 申请(专利权)人: | 内帕基因株式会社 |
主分类号: | C12N15/00 | 分类号: | C12N15/00;C12N15/09 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 孔青;郭文洁 |
地址: | 日本千叶*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 通过 穿孔 技术 进行 基因 转移 方法 | ||
1. 一种通过电穿孔技术将外源基因转移至动物细胞的方法,所述方法包括:将具有至少300 V/cm或更大的电场强度的第一电脉冲施加于动物细胞,使得总热量强度为0.2-40 J/100μL;和施加具有至少15 V/cm或更大的电场强度的第二电脉冲,使得每次脉冲的热量强度为0.01-5 J/100μL。
2. 如权利要求1所述的转移外源基因的方法,其中所述第二电脉冲的施加进行2次或更多次。
3. 如权利要求1或2所述的转移外源基因的方法,其中在施加所述第一电脉冲后,进行所述第二电脉冲的施加少于1分钟。
4. 如权利要求1-3中任一项所述的转移外源基因的方法,其中所述动物细胞为哺乳动物细胞。
5. 如权利要求1-4中任一项所述的转移外源基因的方法,其中所述动物细胞为悬浮在溶液中的动物细胞。
6. 如权利要求1-5中任一项所述的转移外源基因的方法,其中所述溶液为能够用于培养所述动物细胞的液体培养基。
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