[发明专利]低度O-糖基化的FGF21的制备方法在审
| 申请号： | 201180006741.5 | 申请日： | 2011-01-20 |
| 公开（公告）号： | CN102791730A | 公开（公告）日： | 2012-11-21 |
| 发明（设计）人： | R.斯拉比;I.劳特鲁普-拉森 | 申请（专利权）人： | 诺沃—诺迪斯克有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/50 | 分类号： | C07K14/50;C12P21/00 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人： | 孔青;李进 |
| 地址： | 丹麦*** | 国省代码： | 丹麦;DK |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 低度 糖基化 fgf21 制备 方法 | ||
1.一种在酵母中重组表达FGF21及其类似物的方法，其中所使用的酵母为pmt2敲除株系。
2.如权利要求1所述的方法，其中制备具有N-末端延伸的FGF21类似物。
3.如权利要求1所述的方法，其中所使用的酵母为酿酒酵母。
4.如权利要求1或2所述的方法，其中所使用的酵母为pep4敲除株系。
5.如前述权利要求任一项所述的方法，其中所使用的酵母为yps1敲除株系。
6.如前述权利要求任一项所述的方法，其中所使用的酵母为mkc7敲除株系。
7.如前述权利要求任一项所述的方法，其中所述酵母在外源DNA序列得到表达的条件下进行培养，并且回收所需的FGF21或其类似物。
8.如前述权利要求任一项所述的方法，其中所述FGF21被分泌至培养基中。
9.如前述权利要求任一项所述的方法，其中所述敲除pmt2的酵母株系使用TRP1标记或KanMX4标记、优选使用TRP1标记制备。
10.如前述权利要求任一项所述的方法，其中一方面O-糖基化的FGF21或其衍生物与另一方面的非O-糖基化的FGF21或其类似物的比值(重量/重量)低于约20%，优选低于约10%，更优选低于约5%，再更优选低于约2%。
11.如任一项所述的方法，其中所制备的FGF21类似物在R17和/或R36位上发生了突变。
12.如前述方法权利要求任一项所述的方法所制备的FGF21。
13.本发明所描述的任意新的特征或特征的组合，尤其是在说明书条款或权利要求书中所描述的特征。
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