[发明专利]用于制备气雾剂的方法和组合物

说明书

技术领域

本发明涉及用于制备气雾剂的方法。更具体地，本发明提供了用于制备免疫球蛋白单可变结构域的气雾剂的方法，其中显著减少聚集体形成的量。本发明另外提供了通过本发明的方法制备的气雾剂，以及用于本发明的方法中的组合物。

本发明另外涉及用于制备所述组合物的方法，包含所述组合物的容器、试剂盒和气雾剂递送系统，以及它们的用途。

从本文中的进一步描述，会明白本发明的其它方面、实施方案、优点和应用。

背景技术

免疫球蛋白单可变结构域(如本文进一步所述)的特征在于，由单可变结构域形成抗原结合位点，其不需要与另外的结构域相互作用(例如以VH/VL相互作用的形式)来进行抗原识别。已经描述了针对宽范围的不同靶标的免疫球蛋白单可变结构域(WO 04/062551、WO 05/044858、WO06/040153、WO 06/122825、WO 07/104529、WO 08/020079、WO 08/074839、WO 08/071447、WO 08/074840、WO 08/074867、WO 08/077945、WO08/101985、WO 08/142164、WO 09/068625、WO 08/142165、WO 09/068627)，它们可以成为药物开发的候选物。在例如WO 09/068627中，已经描述了针对IL-23的p19亚基的免疫球蛋白单可变结构域，其阻断IL-23与它的受体的相互作用。例如在WO 09/147248中，已经描述了针对人呼吸道合胞病毒(hRSV)的F蛋白的免疫球蛋白单可变结构域，其可以中和hRSV。

在临床前或临床开发中的大多数免疫球蛋白单可变结构域已经肠胃外地(即通过静脉内或皮下给药)施用，且已经描述了用于这些给药方法的稳定制剂(参见例如基于美国临时申请号US 61/275,816(2009年9月3日提交)的PCT申请号PCT/EP2010/062972(2010年9月3日提交)，和基于美国临时申请号US 61/284,502(Ablynx N.V.于2009年12月18日提交)的PCT申请号PCT/EP2010/062975(2010年9月3日提交))。但是，这些递送方法具有相当低的患者接受性，因此需要可以由患者自己容易地执行的替代性的、更方便的(无针头的)给药模式。

一种可能的替代方法是，通过肺递送免疫球蛋白单可变结构域。通过吸入、口服地和/或经鼻地，可以实现肺药物递送。用于肺递送的药用装置的实例包括：定量吸入器(MDI)、干粉吸入器(DPI)和雾化器。传统地，已经将雾化器分类成2个主要类型：空气喷射(气动的)装置和超声装置。最近，第三类振动网孔式雾化器(vibrating-mesh nebulizer)已经商业化(Newman和Gee-Turner，2005，J.Appl.Ther.Res.5：29-33)。

雾化器是开发用于肺递送的基于药用蛋白的药物的合理首选，因为大多数蛋白质经过纯化，并作为水性浓缩物进行储存。但是，货架上的水溶液的稳定性可能不能转换为雾化过程中的稳定性，蛋白质可能通过几种机理变性，所述机理包括干燥、剪切和表面效应(Charm和Wong，1970，Biotechnol.Bioeng 12：1103-1109；Andrews，1991，Biochem.Soc.Trans，272S19)。例如，经证实，雾化会诱发乳酸脱氢酶(LDH)的酶活性的丧失，并导致重组人粒细胞刺激因子(G-CSF)的聚集(主要由二聚体形成组成)和降解(Niven和Brain，1994，Int.J.Pharm.，104：73-85)。

WO 04/041867描述了用于免疫球蛋白单可变结构域的肺递送的方法和组合物。在WO 09/074634中，描述了直接肺递送结构域抗体的方法，和适用于直接肺递送的具体结构域抗体组合物。更具体地，描述了这样的组合物，所述组合物包含结构域抗体多肽和含有2％至约10％PEG1000和1.2％蔗糖(w/v)的缓冲液。这些结构域抗体组合物似乎具有这样的粘度：所述粘度允许产生具有正确尺寸的足够微滴，所述尺寸适合通过直接局部肺递送施用给受试者。上述文件都没有描述或讨论在免疫球蛋白单可变结构域的肺递送过程中的聚集体形成的减少和/或稳定性的提高。仍然需要用于通过肺途径递送完整的和有功能的免疫球蛋白单可变结构域的其它方法和组合物。

发明内容