[发明专利]替加环素用于治疗癌症的用途

说明书

相关申请

本申请为专利合作条约申请，其要求35 U.S.C. 119的利益，所述利益基于2010年3月10日提交的相应美国临时专利申请No. 61/312,410的优先权，所述专利申请以其全文并入本文。

发明领域

本发明涉及用于治疗癌症的方法和组合物，尤其涉及包含替加环素以用于治疗白血病的方法和组合物，所述白血病例如急性髓性白血病（AML）。

发明背景

癌症干细胞

目前癌症治疗最有挑战性的方法可能即癌症干细胞（CSC）。在1961年首次由Till和McCulloch¹描述了干细胞，通常通过干细胞自我更新和分化成各种细胞类型的能力的潜力对其进行定义。据信，包括少部分肿瘤的癌症干细胞具有开始和支持肿瘤发生过程的能力。在治疗过程中难以根除它们，因此它们已经成为癌症治疗的引人兴趣的目标。

用于癌症干细胞假说的很多证据来自恶性血液病的研究。Dick和同事进行的研究²在来自急性髓性白血病（AML）患者的外周血的小隔室（compartment）中发现了白血病干细胞（LSC）。然后他们得以将这些LSC成功地移植到非肥胖糖尿病重症联合免疫缺陷（NOD-SCID）小鼠的骨髓，在该处，这些人细胞增殖并且所散布的表型类似于原患者中的表型。因此，LSC的当前功能标准为向NOD-SCID小鼠中的成功移植。

尽管LSC具有自我更新和分化的能力，证据表明，在静止G0期中发现大量LSC³。这可能是化学疗法无法去除LSC的原因，因为化学疗法通常靶向处于快速周期中的细胞群。LSC抗药物和毒素的其它原因可能是ATP相关转运体的表达⁴和对细胞凋亡刺激的抗性⁵。因此，发现将直接作用于白血病干细胞存活力的新的治疗性化合物，可能是有益的。

发明内容

本发明的一个方面包括在癌细胞中诱导细胞毒性的方法，所述方法包括使所述细胞接触甘氨酰环素。

本发明的另一个方面包括治疗癌症的方法，所述方法包括给有此需要的受试者施用有效量的甘氨酰环素，例如替加环素。

本发明的另一个方面包括甘氨酰环素用于治疗癌症的用途，所述甘氨酰环素例如替加环素。

在一个实施方式中，所述甘氨酰环素包括替加环素。

在一个实施方式中，所述癌症为血液癌症或实体癌。

在一个实施方式中，所述血液癌症为白血病。在另一个实施方式中，所述白血病为急性髓性白血病（AML）。

出于下述详细表述，本发明的其它特征和优点将变得显而易见。然而，应该理解，所述详细描述和具体实施例尽管指明了本发明的优选实施方式，但是其仅通过示例的方式给出，其原因在于，出于此详细描述，在本发明的精神和范围内的各种改变和修饰对于本领域技术人员来说是显而易见的。 

附图简述

现将关于附图描述本发明的实施方式，其中：

图1. TEX和M9-ENL-1细胞中的筛选鉴定了具有新的抗白血病活性的替加环素。（A）将TEX和（B）M9-ENL1细胞铺板于96孔板中，然后将药物加入孔中（5 μΙ /孔），最终浓度为10 μΜ（示出）和1 μΜ。在48小时（M9-ENL-1）和72小时（TEX）通过MTS测定测量细胞生长和存活力。以占单独用DMSO治疗的细胞的百分比示出了每种化合物的细胞存活力。将（C）白血病、（D）骨髓瘤、和（E）实体瘤细胞系接种于96孔板中，然后用浓度渐增的替加环素处理。在72小时通过MTS测定测量细胞生长和存活力。将细胞存活力表示为相对于经溶媒处理的细胞的百分比平均值加或减SD（n = 3）。（F）通过流式细胞术以膜联蛋白V标记的细胞的百分比进行测定，替加环素在TEX细胞中显示了细胞凋亡的时间依赖性的增加。（G）将TEX细胞接种于96孔板中，然后用浓度渐增的替加环素、米诺环素和四环素处理。在72小时通过MTS测定测量细胞存活力。将细胞存活力表示为相对于经溶媒处理的细胞的百分比平均值加或减SD（n = 3）。